miR-124靶向OSX对牙周膜干细胞成骨分化能力的调控作用

发布时间：2021-08-19 21:53

　　目的:探索mi R-124对人牙周膜干细胞（periodontal ligament stem cells,PDLSCs）成骨分化能力的影响及调控机制。方法:分离、纯化培养人PDLSCs,检测牙PDLSCs成骨诱导前后mi R-124和Osterix（OSX）的表达;转染mi R-124沉默（inhibitor）及过表达模拟物（mimics）;实时定量PCR（q PCR）检测mi R-124和OSXm RNA水平的表达;Western blot检测OSX蛋白水平的变化,茜素红染色分析PDLSCs成骨分化能力的变化;生物信息学手段分析mi R-124的靶基因,并通过双荧光素酶报告实验进行验证;共转染mi R-124 inhibitor和OSX小干扰RNA（siRNA）,检测共转染后对PDLSCs成骨分化能力及OSX表达的影响。结果:成骨分化诱导后PDLSCs中mi R-124的表达明显下调,而OSX的表达则显著升高;过表达mi R-124可明显抑制OSX的表达和PDLSCs的成骨分化能力,抑制mi R-124的表达,则结果相反;生物信息学手段分析OSX为mi R-124的潜在靶基因,双荧... 

【文章来源】：中华老年口腔医学杂志. 2020,18(02)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

牙周膜干细胞成骨诱导后mi R-124和成骨相关基因的表达

mi R-124对PDLSCs的成骨分化能力的影响

miR-124的靶基因为OSX生物信息学分析预测发现OSX为miR-124的潜在靶基因，图2结果显示miR-124 mimics组中OSX的表达明显低于对照组，说明OSX可被miR-124负向调控。采用双荧光素酶报告基因实验证实OSX是miR-124的靶基因，检测结果显示，OSX-WT+miR-124组的荧光比值低于OSX-WT+miR-NC组(图3)，差异具有统计学意义(P<0.05)。OSX-MUT+miR-124组和OSX-MUT+miR-NC组的荧光比值分别为0.952±0.047和1.0±0.073，差异无统计学意义(P>0.05)。表明miR-124可与OSX基因3’-UTR位点结合，miR-124与OSX存在直接负向调控关系。2.4 沉默OSX能逆转miR-124 inhibitor对PDLSCs成骨向分化的促进作用

【参考文献】：
期刊论文
[1]成骨特异转录因子Runx2在去势大鼠正畸牙移动牙周组织中的表达[J]. 代庆刚,江凌勇,张鹏,吴玉琼,马旭辉,房兵.  中华老年口腔医学杂志. 2014(01)
[2]牙周病与糖尿病关系的研究进展[J]. 刘玉凤,柯杰,赵桂芝.  中华老年口腔医学杂志. 2010(03)
[3]组织工程牙再生发育的研究进展[J]. 赵征,刘洪臣.  中华老年口腔医学杂志. 2009(04)



本文编号：3352210