放线共生放线杆菌培养上清对成骨细胞分化及间隙连接通讯的影响
发布时间：2021-08-25 20:16
目的探讨放线共生放线杆菌（actinobacillus actinomycetemcom itans,A.a）培养上清对成骨细胞分化以及细胞间隙连接通讯的影响。方法在A.a培养上清中体外培养成骨细胞,中性红检测成骨细胞活性,RT-PCR检测成骨细胞分化标记,免疫组化观察Ⅰ型胶原蛋白表达,利用划痕标记荧光染料示踪（SLDT）法与Westernblot检测Connexin43的表达,研究成骨细胞间隙连接通讯的变化。结果20%以下浓度的A.a培养上清对成骨细胞无明显致死性。RT-PCR结果显示A.a培养上清中成骨细胞分化标记的表达降低。免疫组化结果显示A.a培养上清中成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达降低。SLDT法结果显示A.a培养上清中成骨细胞荧光染料扩散低于对照组。Western blot检测结果显示A.a培养上清中成骨细胞Connexin43表达降低。结论A.a培养上清对成骨细胞分化及细胞间隙连接通讯有抑制作用。
【文章来源】：第三军医大学学报. 2010,32(10)北大核心CSCD
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
不同浓度A.a培养上清对成骨细胞分化的影响
A:alpha-MEM,24 h;B:5%A.a培养上清,24 h图3 SLDT法检测成骨细胞GJIC变化LY荧光扩散距离 (×100) 图4显示5株不同菌株A.a培养上清对成骨细胞MC3T3-E1的GJIC抑制结果。所有菌株培养上清与对照组相比对成骨细胞GJIC有50% ~70%的抑制作用,所有菌株培养液对成骨细胞GJIC抑制作用没有统计学差异(P>0·05)。因此决定使用A.a标准株ATCC43717进行实验。图4 不同A.a菌株培养上清对成骨细胞MC3T3-E1GJIC的影响2. 3. 2 不同浓度A.a培养上清对GJIC的影响 A.a培养上清浓度越大,对GJIC的抑制作用越明显(图5)。5%浓度的A.a培养上清与对照组相比对成骨细胞GJIC有60%以上的抑制作用。a:P<0. 01,与A.a培养上清浓度0%比较图5 A.a培养上清浓度对GJIC的影响2. 3. 3 随时间推移A. a培养上清对GJIC的影响 随时间推移A.a培养上清对GJIC的作用结果见图6。加入A. a培养上清30 min后开始出现GJIC的抑制作用,培养24 h检测A. a培养上清对GJIC的抑制作用最明显。24、48 h更换不含A. a培养上清的培养基继续培养成骨细胞,GJIC在72 h后恢复到原有水平。2. 4 A.a培养上清对Connexin43表达的影响 图7显示5%A. a培养上清培养成骨细胞24、72 h, Cx43蛋白条带的3种亚型,相对分子质量大小为43×103、40×103和39×103
图4 不同A.a菌株培养上清对成骨细胞MC3T3-E1GJIC的影响2. 3. 2 不同浓度A.a培养上清对GJIC的影响 A.a培养上清浓度越大,对GJIC的抑制作用越明显(图5)。5%浓度的A.a培养上清与对照组相比对成骨细胞GJIC有60%以上的抑制作用。a:P<0. 01,与A.a培养上清浓度0%比较图5 A.a培养上清浓度对GJIC的影响2. 3. 3 随时间推移A. a培养上清对GJIC的影响 随时间推移A.a培养上清对GJIC的作用结果见图6。加入A. a培养上清30 min后开始出现GJIC的抑制作用,培养24 h检测A. a培养上清对GJIC的抑制作用最明显。24、48 h更换不含A. a培养上清的培养基继续培养成骨细胞,GJIC在72 h后恢复到原有水平。2. 4 A.a培养上清对Connexin43表达的影响 图7显示5%A. a培养上清培养成骨细胞24、72 h, Cx43蛋白条带的3种亚型,相对分子质量大小为43×103、40×103和39×103,分别代表磷酸化P2带,磷酸化P1带和非磷酸化NP带。随A.a培养上清培养时间推移
【参考文献】：
期刊论文
[1]臭氧水对伴放线放线杆菌的灭活效果观察[J]. 余芳,王小平,易敏,李辰,李鸣宇,朱彩莲. 中华口腔医学研究杂志(电子版). 2009(02)
[2]牙周洁治和健康教育对正畸治疗中患者牙周健康的意义[J]. 熊剑. 咸宁学院学报(医学版). 2008(06)
[3]口腔正畸治疗对牙周组织的影响[J]. 雷畅,崔德泉,苏雪艳. 山东医药. 2008(33)
[4]bFGF-PLA-Ns对体外培养成骨细胞增殖、分化及矿化的影响[J]. 张纲,亓连军,谭颖徽,卢来春,裘松波,何飞. 第三军医大学学报. 2007(21)
[5]伴放线放线杆菌与牙周病相关细胞凋亡关系的研究[J]. 张迪亚,李盛来,陈莉丽. 国际口腔医学杂志. 2007(02)
[6]高浓度臭氧水稳定性及杀菌效果的试验观察[J]. 徐亚军,刘衡川,谷素英,文海燕,方梅. 中国消毒学杂志. 2007(01)
[7]雌性去势大鼠骨细胞内间隙连接蛋白43阳性表达率的动态变化及意义[J]. 蔚芃,袁国华,杨明辉,陈路,郭春,蒋科,朱治健. 川北医学院学报. 2006(04)
[8]碱性磷酸酶和骨钙素在成骨过程中表达的定量研究[J]. 常新,侯志明,柴田恭明,塚崎智雄,山口朗. 华西口腔医学杂志. 2005(05)
[9]正畸治疗中牙龈指数及龈沟液细菌的变化研究[J]. 肖水清,张勇,宋新宇,郑静. 中华口腔正畸学杂志. 2004 (04)
本文编号：3362783
【文章来源】：第三军医大学学报. 2010,32(10)北大核心CSCD
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
不同浓度A.a培养上清对成骨细胞分化的影响
A:alpha-MEM,24 h;B:5%A.a培养上清,24 h图3 SLDT法检测成骨细胞GJIC变化LY荧光扩散距离 (×100) 图4显示5株不同菌株A.a培养上清对成骨细胞MC3T3-E1的GJIC抑制结果。所有菌株培养上清与对照组相比对成骨细胞GJIC有50% ~70%的抑制作用,所有菌株培养液对成骨细胞GJIC抑制作用没有统计学差异(P>0·05)。因此决定使用A.a标准株ATCC43717进行实验。图4 不同A.a菌株培养上清对成骨细胞MC3T3-E1GJIC的影响2. 3. 2 不同浓度A.a培养上清对GJIC的影响 A.a培养上清浓度越大,对GJIC的抑制作用越明显(图5)。5%浓度的A.a培养上清与对照组相比对成骨细胞GJIC有60%以上的抑制作用。a:P<0. 01,与A.a培养上清浓度0%比较图5 A.a培养上清浓度对GJIC的影响2. 3. 3 随时间推移A. a培养上清对GJIC的影响 随时间推移A.a培养上清对GJIC的作用结果见图6。加入A. a培养上清30 min后开始出现GJIC的抑制作用,培养24 h检测A. a培养上清对GJIC的抑制作用最明显。24、48 h更换不含A. a培养上清的培养基继续培养成骨细胞,GJIC在72 h后恢复到原有水平。2. 4 A.a培养上清对Connexin43表达的影响 图7显示5%A. a培养上清培养成骨细胞24、72 h, Cx43蛋白条带的3种亚型,相对分子质量大小为43×103、40×103和39×103
图4 不同A.a菌株培养上清对成骨细胞MC3T3-E1GJIC的影响2. 3. 2 不同浓度A.a培养上清对GJIC的影响 A.a培养上清浓度越大,对GJIC的抑制作用越明显(图5)。5%浓度的A.a培养上清与对照组相比对成骨细胞GJIC有60%以上的抑制作用。a:P<0. 01,与A.a培养上清浓度0%比较图5 A.a培养上清浓度对GJIC的影响2. 3. 3 随时间推移A. a培养上清对GJIC的影响 随时间推移A.a培养上清对GJIC的作用结果见图6。加入A. a培养上清30 min后开始出现GJIC的抑制作用,培养24 h检测A. a培养上清对GJIC的抑制作用最明显。24、48 h更换不含A. a培养上清的培养基继续培养成骨细胞,GJIC在72 h后恢复到原有水平。2. 4 A.a培养上清对Connexin43表达的影响 图7显示5%A. a培养上清培养成骨细胞24、72 h, Cx43蛋白条带的3种亚型,相对分子质量大小为43×103、40×103和39×103,分别代表磷酸化P2带,磷酸化P1带和非磷酸化NP带。随A.a培养上清培养时间推移
【参考文献】：
期刊论文
[1]臭氧水对伴放线放线杆菌的灭活效果观察[J]. 余芳,王小平,易敏,李辰,李鸣宇,朱彩莲. 中华口腔医学研究杂志(电子版). 2009(02)
[2]牙周洁治和健康教育对正畸治疗中患者牙周健康的意义[J]. 熊剑. 咸宁学院学报(医学版). 2008(06)
[3]口腔正畸治疗对牙周组织的影响[J]. 雷畅,崔德泉,苏雪艳. 山东医药. 2008(33)
[4]bFGF-PLA-Ns对体外培养成骨细胞增殖、分化及矿化的影响[J]. 张纲,亓连军,谭颖徽,卢来春,裘松波,何飞. 第三军医大学学报. 2007(21)
[5]伴放线放线杆菌与牙周病相关细胞凋亡关系的研究[J]. 张迪亚,李盛来,陈莉丽. 国际口腔医学杂志. 2007(02)
[6]高浓度臭氧水稳定性及杀菌效果的试验观察[J]. 徐亚军,刘衡川,谷素英,文海燕,方梅. 中国消毒学杂志. 2007(01)
[7]雌性去势大鼠骨细胞内间隙连接蛋白43阳性表达率的动态变化及意义[J]. 蔚芃,袁国华,杨明辉,陈路,郭春,蒋科,朱治健. 川北医学院学报. 2006(04)
[8]碱性磷酸酶和骨钙素在成骨过程中表达的定量研究[J]. 常新,侯志明,柴田恭明,塚崎智雄,山口朗. 华西口腔医学杂志. 2005(05)
[9]正畸治疗中牙龈指数及龈沟液细菌的变化研究[J]. 肖水清,张勇,宋新宇,郑静. 中华口腔正畸学杂志. 2004 (04)
本文编号：3362783
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