天然牙本质诱导BMMSCs向成牙本质细胞样细胞分化的实验研究
发布时间：2021-08-27 19:27
研究目的:利用天然牙本质诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs）向成牙本质细胞样细胞分化,为寻找新的牙齿组织再生的种子细胞来源以及实现牙髓病由传统的物理充填治疗向生物学治疗转变提供理论依据。研究方法:通过全骨髓贴壁法获取大鼠骨髓间充质干细胞并对其组织来源及多向分化能力进行初步鉴定,并取第3 5代细胞用于后续实验。体外实验:取1×104个BMMSCs细胞与牙本质片共培养于24孔培养板中,培养2 w后固定、脱矿、包埋、连续切片,通过苏木素-伊红（hematoxylin-eosin, HE）,Masson三色法和免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）染色检测细胞在牙片周围生长状况、组织形态学变化及牙本质涎蛋白（dentin sialoprotein, DSP）的表达情况。体内实验:收集5×106个BMMSCs细胞与牙本质片复合后移植到大鼠肾被膜下,6 w后取材、固定、脱矿、包埋、连续切片,通过HE、Masson三色法和IHC染色检测细胞在牙片周围形态变化和DSP的表达情况。另...
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
全骨髓贴壁法培养的BMMSCs形态学观察A：刚贴壁的细胞大部分呈圆形或者短棒状，透亮，周围有光晕（×40）；B：部
图 1.1 全骨髓贴壁法培养的 BMMSCs 形态学观察A：刚贴壁的细胞大部分呈圆形或者短棒状，透亮，周围有分细胞呈梭形，发出突起（×100）；C：8 ~ 10 d 左右细胞生传代后细胞逐渐伸展，有时可见分裂期的多核仁细胞（×1形态较均一的细胞（×40）；F：10 代以上的细胞胞体增大，老现象（×100）；
图 1.3 BMMSCs 的增殖状况及周期分布A：BMMSCs 在接种后第 3 天左右进入对数生长期，第 7 天左右进入平台期，整体生长曲线呈“S”形；B：BMMSCs的G0/G1期、S期及G2/M 期比例分别为 72.71%、20.90%及 6.39%。图 1.4 BMMSCs 的成骨及成脂分化A：经矿化诱导液诱导后 BMMSCs 的成骨能力明显增强；B：经成脂诱导液诱导后 BMMSCs 内有油红 O 染色阳性的脂滴形成（×100）；C：未经成脂诱导的BMMSCs 无脂滴形成（×100）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]牙本质非胶原蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和矿化能力的影响[J]. 刘晨晨,雷港,俞艳,王赛楠,闫明,于金华,张光东. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2010(05)
[2]人牙髓细胞在离体牙髓腔内向成牙本质细胞样细胞分化的研究[J]. 朱轶萍,张光东,吴友农. 口腔医学. 2008(01)
本文编号：3366953
【文章来源】：南京医科大学江苏省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
全骨髓贴壁法培养的BMMSCs形态学观察A：刚贴壁的细胞大部分呈圆形或者短棒状，透亮，周围有光晕（×40）；B：部
图 1.1 全骨髓贴壁法培养的 BMMSCs 形态学观察A：刚贴壁的细胞大部分呈圆形或者短棒状，透亮，周围有分细胞呈梭形，发出突起（×100）；C：8 ~ 10 d 左右细胞生传代后细胞逐渐伸展，有时可见分裂期的多核仁细胞（×1形态较均一的细胞（×40）；F：10 代以上的细胞胞体增大，老现象（×100）；
图 1.3 BMMSCs 的增殖状况及周期分布A：BMMSCs 在接种后第 3 天左右进入对数生长期，第 7 天左右进入平台期，整体生长曲线呈“S”形；B：BMMSCs的G0/G1期、S期及G2/M 期比例分别为 72.71%、20.90%及 6.39%。图 1.4 BMMSCs 的成骨及成脂分化A：经矿化诱导液诱导后 BMMSCs 的成骨能力明显增强；B：经成脂诱导液诱导后 BMMSCs 内有油红 O 染色阳性的脂滴形成（×100）；C：未经成脂诱导的BMMSCs 无脂滴形成（×100）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]牙本质非胶原蛋白对大鼠骨髓间充质干细胞增殖活性和矿化能力的影响[J]. 刘晨晨,雷港,俞艳,王赛楠,闫明,于金华,张光东. 牙体牙髓牙周病学杂志. 2010(05)
[2]人牙髓细胞在离体牙髓腔内向成牙本质细胞样细胞分化的研究[J]. 朱轶萍,张光东,吴友农. 口腔医学. 2008(01)
本文编号：3366953
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