不同浓度D-缬氨酸对小鼠成纤维细胞L929增殖和凋亡的影响

发布时间：2021-09-23 01:40

　　背景与目的:种植体周围炎和种植体周围黏膜炎作为一种常见的种植并发症,已备受临床医生关注。众所周知,导致种植体周围炎发生的始动因素是种植体颈部菌斑生物膜的积聚。因此,如何有效的清除和控制菌斑则是治疗的关键所在。近年来多种研究表明D型氨基酸（右旋氨基酸）在抑菌和破坏生物膜方面表现出良好的潜力,有望应用于控制生物膜的感染。本课题为国家自然基金中的部分研究内容,课题组前期实验已证实特定浓度（50-150mM）下的D-缬氨酸（D-valine,D-val）能有效抑制牙龈卟啉单胞菌生物膜的形成,有望将其应用于控制生物膜感染的治疗。但关于该浓度下的D-缬氨酸的细胞毒性作用及安全浓度范围还未见有明确的报道。因此,明确其生物安全性并筛选出安全浓度范围的D-缬氨酸,为其可能作为抑制生物膜形成或/和分散已形成的生物膜的制剂,治疗种植体周围炎具有重要意义。方法:1、培养小鼠成纤维L929细胞,组织学观察细胞形态及生长状态,绘制生长曲线。2、实验组分别加入不同浓度的D-val,对照组加入等体积的DMEM培养液。分别在第1、3、5天采用CCK-8法检测不同浓度的D-val对成纤维细胞L929增殖活性的影响。3、实... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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图３．１．ＢＬ９２９细胞生长曲线??

３．?１Ａ）。培养第５天后，测定不同接种浓度下细胞的吸光度值，绘制生??长曲线。可见当细胞密度大于６０００／孔时，吸光度值开始下降，当细胞??密度为６０００时吸光度值达到最高峰（图３．?１Ｂ）。??＿??图３．１．Ａ培养瓶内贴壁生长的细胞（ｘ２０?）??２．５－１?Ｌ９２９?ｃｅｌｌ?ｇｒｏｗｔｈ?ｃｕｒｖｅ??！?；：??Ｉ１。－?ｚ??０．５－??０．０?＇?■ｉ?＇?ｉ?ｉ?？?？??２０００?４０００?６０００?８０００?１００００??ｄｅｎｔｉｓｔｙ（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）??图３．１．ＢＬ９２９细胞生长曲线??１４??

不同浓度Ｄ－ｖａｌ培养５天后的Ｌ９２９细胞，经ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ??双标记后，进行流式细胞仪检测。结果表明：对照组的成纤维细胞凋??亡比例为５．?７７％土０．８１?（图３．３Ａ），与对照组相比，１５０ｍＭ组的细胞??凋亡比例低于对照组，约为３．５９％±０．９１（图３．３Ｃ），结果具有统计学??差异（Ｐ＜〇．?〇５）。１２５、１００、７５、５０ｍＭ组中细胞的早期凋亡率分别为??４．?３３％±０．?８５，?４．?０１％±０．８３，?４．?２７％±０．８８，?３．?９２％±１．０１?（图?３．３Ｃ－Ｆ），??与对照组相比较凋亡率有所减低，但结果均无统计学意义（Ｐ＞〇．?０５）。??ｒｒ?????°：?０．４４?６．２９?＇?０．７２?１６．７０??☆?崩義．?，?丨桑導．．．．??…，，，４?＇ｉ…：ｒ－＇１？??Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ－ＦＩＴＣ?Ａｎｎｅｘｉｎ－Ｖ－ＦＩＴＣ??３．?３?Ａ?对照组


本文编号：3404772