钛离子通过TGF-β/Smad蛋白通路对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响

发布时间：2021-10-13 21:11

　　实验目的:口腔种植体周存在低浓度钛离子现已被相关研究证实。本研究通过在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度钛离子,建立细胞模型,检测MC3T3-E1细胞在一定浓度的钛离子中增殖变化,并通过检测成骨相关因子的表达研究MC3T3-E1细胞成骨分化的变化,并且通过检测TGF-β/Smad蛋白通路相关蛋白的表达,探究钛离子是否会通过TGF-β/Smad通路影响MC3T3-E1细胞的成骨分化,从而对临床产生指导意义。实验方法:1.对MC3T3-E1细胞进行培养,加入10,50,100,200μmol/L钛离子进行细胞毒实验。2.筛选出10 μmol/L钛离子浓度与细胞共培养1天,4天,7天和14天后检测细胞的增殖情况。3.通过qRT-PCR检测1天,4天,7天MC3T3-E1细胞成骨相关因子Runx2,OCN,ALP,Colla1的基因表达。4.通过ALP、茜素红染色检测MC3T3-E1细胞的成骨分化情况。5.通过qRT-PCR检测1天,4天,7天后MC3T3-E1细胞中TGF-β/Smad 通路相关因子 TGF-β1,TGF-βr1,TGF-βr2,Smad2 和Smad3的基因表达。6.通过W... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图３．?１钛离子浓度为１０?ｎｍｏｌ／Ｌ时促进了?ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞的增殖??Ａ：细胞毒性测定显示浓度为２００ｉｍｏｌ／Ｌ的钛离子对细胞有毒性

?■?１０ｐｍｏｔ／Ｌ??ｉｌｉｉａｕｉ?ｌｌｉＬｕ??图３．?３成骨基因在ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞中的表达。??Ａ：在第１，４和７天，１０?｜＿ｉｍｏｌ／Ｌ组Ｒｕｎｘ２的表达显著增加。Ｂ：第１天和第４天，??１０?ｐｍｏｌ／Ｌ组的０ＣＮ表达较低，但第７天则较高。Ｃ：在第１，４和７天，１０?ｐｍｏｌ／Ｌ??组ＡＬＰ的表达增加，仅在第１天有显著性差异。Ｄ：?１０?ｐｍｏｌ／Ｌ组中Ｃｏｌｌａｌ的表??达增加。第１天和第４天存在显著性差异。（＊ｐ＜０．０５）??１７??

一?■?Ｉ??图３．?２碱性磷酸酶活性和茜素红染色（４０ｘ）??Ａ：在第１，４和７天的ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞的碱性磷酸酶活性。Ｂ：由茜素红染色的钙??结节，洗脱后染液的吸光度值（６２０?ｎｍ）大小。在第１４天，各组之间没有显著??性差异。在第２１天和第２８天，丨０?ｐｍｏｌ／Ｌ组的吸光度值显著增加。Ｃ：在光学??显微镜下观察，发现在第２１天和第２８天，１０?Ｍｍｏｌ／Ｌ组可见更多的钙结节。（＊??ｐ＜０．０５）??Ａ?ＲＵｎｘ２?Ｂ?ＯＣＮ??Ｂ?ｅ??ｌ１５］?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?ｌ３］?＊?■Ｃｏｎｔｒｏｌ??Ｉ．?＊?ｍ?１〇Ｍｍ〇ｌ／Ｌ?■?１〇Ｍｍ〇ｌ／Ｌ??卜?｜?ｒ??ｊｊｊ．Ｊ?Ｊ?ｌｉｉｔｉｕｌ??０?＇６?ｎ６?＾?令??Ｃ?ＡＬＰ?Ｄ?Ｃｏｌ１ａ１??｜?今?？?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｊ４＊?ａ?■?Ｃｏｎｔｒｏｌ??｜?３．?ｊ?■?１〇Ｍｍ〇ｌ／ＬＳ?ｙ?■?■?１０ｐｍｏｔ／Ｌ??ｉｌｉｉａｕｉ?ｌｌｉＬｕ??图３．?３成骨基因在ＭＣ３Ｔ３－Ｅ１细胞中的表达。??Ａ：在第１，４和７天，１０?｜＿ｉｍｏｌ／Ｌ组Ｒｕｎｘ２的表达显著增加。Ｂ：第１天和第４天，??１０?ｐｍｏｌ／Ｌ组的０ＣＮ表达较低，但第７天则较高。Ｃ：在第１，４和７天，１０?ｐｍｏｌ／Ｌ??组ＡＬＰ的表达增加，仅在第１天有显著性差异。Ｄ：?１０?ｐｍｏｌ／Ｌ组中Ｃｏｌｌａｌ的表??达增


本文编号：3435407