具核梭杆菌感染Tca8113舌鳞癌细胞发生DNA损伤并通过Ku70/p53途径促进细胞增殖

发布时间：2021-11-04 19:09

　　目的:近年来,研究发现牙周可疑致病菌感染与许多重要肿瘤相关。具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum）作为重要牙周病致病菌广泛存在于口腔中,属橙色复合体,梭杆菌属,兼性厌氧菌,研究显示F.nucleatum比口腔其他细菌更广泛存在于身体其他器官,与呼吸系统疾病,肝脓肿,早产等疾病密切相关。细胞DNA损伤是细菌破坏基因组稳定性和完整性,从而影响肿瘤细胞的遗传改变的重要机制,其中真核细胞内最常见的损伤为DNA双链断裂（DNA double-strand break,DSB）,人类和高等真核生物中最常见的DSB的主要修复途径是非同源重组修复（Non-homologous end joining,NHEJ）,因此本文探讨F.nucleatum感染口腔鳞癌细胞发生DNA双链断裂损伤后影响基因组的稳定性和完整性,并对细胞增殖能力产生调控作用。通过检测DSB标志因子γH2AX表达构建F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞DNA损伤模型,观察细胞增殖和细胞周期的变化,进一步检测NHEJ重要修复因子Ku70,抑癌因子wild p53,抑癌因子p27和... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

Westernblot检测F.nucleatum感染Tca8113舌鳞癌细胞4h，γH2AX表达变化情况

图 3.2 F.nucleatum 感染 Tca8113 舌鳞癌细胞 36h，γH2AX 表达变化情况A：Western blot 检测γH2AX 的电泳图，B：各组γH2AX 的灰度值柱状图。F.nucleatum（MOI=500）感染 Tca8113 舌鳞癌细胞 36h，损伤因子γH2AX 表达上调并呈现时间依赖性，且24h 显著上调，*表示与空白对照组相比 P＜0.05；#表示与前一时间点相比 P＜0.05。Western blot 结果发现 24h 时，损伤因子γH2AX 表达明显增强，因此选取 24h时间点，运用免疫荧光法进一步验证模型，结果显示在 24h 时γH2AX 相比于空白对照组荧光强度明显增强且数量明显增加（见图 3.3），进一步证明模型构建成功。0h4h12h24h36h0.00.51.01.5grayscalevalue%ofγH2AX**#*AB

atum 感染 Tca8113 舌鳞癌细胞 DNA 损伤模型内，各时间点 F.nucleatum 感染组细胞于空白对照组显著增强，*表示与空白对照组相比细胞增殖率 P＜0.05。cleatum 感染 Tca8113 舌鳞癌细胞发生 DNA 损伤并加速细胞 G1细胞于 S 期leatum 感染 Tca8113 舌鳞癌细胞 DNA 损伤模型内，进一步检测细胞周期，见图 3.6，3.7 和表 3.2），Tca8113 舌鳞癌细胞在 DNA 损伤模型内,各时各自空白对照组 G1 期细胞含量呈现下调状态（P＜0.05），而 S 期细胞 值）除在 36h 呈现少量下调，其余时间点均呈上调状态（P＜0.05），说atum 感染 Tca8113 舌鳞癌细胞 DNA 损伤并调控细胞周期，使细胞阻滞于4h 12h 24h36h0h

【参考文献】：
期刊论文
[1]浅谈牙周病与呼吸道疾病之间的相关性[J]. 谭丽思,潘亚萍.  中国实用口腔科杂志. 2016(03)
[2]Abnormal DNA-PKcs and Ku 70/80 expression may promote malignant pathological processes in gastric carcinoma[J]. Wei Li,Chuan Xie,Zhen Yang,Jiang Chen,Nong-Hua Lu.  World Journal of Gastroenterology. 2013(40)
[3]Predictive role of XRCC5/XRCC6 genotypes in digestive system cancers[J]. Mei-Due Yang,Chia-Wen Tsai,Wen-Shin Chang,Yung-An Tsou,Cheng-Nan Wu,Da-Tian Bau.  World Journal of Gastrointestinal Oncology. 2011(12)



本文编号：3476297