羟基磷灰石与胶原和多壁碳纳米管联合使用对骨缺损修复的作用

发布时间：2021-11-11 06:48

　　目的:骨缺损的修复一直以来是医学领域研究的热点,由于创伤、感染和肿瘤等原因造成的骨缺损需要大量的骨组织修复。近年来骨组织工程已成为骨缺损修复的主要途径。骨组织工程包括三个要素:具有成骨潜能的种子细胞,调节诱导细胞成骨的生长因子,提供基本框架的支架材料。其中支架材料是骨组织工程的关键因素,它促进种子细胞的粘附和生长,为细胞提供了粘附、生长、增殖和分化的环境,在组织的构建中起着关键作用,是组织工程重要的研究内容。本研究的目的是利用羟基磷灰石,胶原和多壁碳纳米管制备复合支架,分析支架的物理、化学及生物学性能,并在支架材料上接种骨髓间充质干细胞,通过体内及体外实验,评价其在骨缺损修复中的作用。研究方法:通过冷冻干燥技术,制备羟基磷灰石/胶原/多壁碳纳米管支架,对支架的吸水率,孔隙率及生物相容性等性能进行测定,探讨胶原及多壁碳纳米管对支架生物学性能的影响,通过扫描电镜,测定支架的孔径及细胞在支架表面的粘附,生长情况。并采用大鼠临界骨缺损模型,利用细胞-支架复合物修复颅骨缺损,观察骨形成的情况。结果:1、实验所制备的支架材料疏松多孔,结构稳定,扫描电镜观察结果显示羟基磷灰石/胶原/多壁碳纳米管支架... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

茜素红染色结果，可见经成骨诱导后，细胞外基质内有多量钙化结节（10X）

中国医科大学硕士学位论文83结果3.1支架基本性能测定支架材料为多孔结构，孔隙率约为70±0.084%，吸水率75±0.37%，孔径约为100-150um。细胞接种到支架后，生长良好。3.2BMSCs光镜下形态学分析：光镜下可见第四代BMSCs图像，可以观察到细胞贴壁生长，成梭形，大小较均匀，紧密分布，说明细胞生长状态良好（图1）。3.3BMSCs成骨诱导结果分析：干细胞在分化为成骨细胞的过程中，在细胞表面沉积钙盐，形成钙结节，茜素红可与其螯合，产生深红色的螯合物，用于鉴定干细胞是否已向成骨细胞分化。染色结果显示，镜下有大量的深红色的复合物存在（图2）。图1光镜下细胞成像，可见紧密分布，大小均匀的梭形细胞（20X）图2茜素红染色结果，可见经成骨诱导后，细胞外基质内有多量钙化结节（10X）

中国医科大学硕士学位论文93.4BMSCs成脂诱导结果分析：油红O是一种红色的脂溶性染料,可与组织、细胞中的甘油三酯发生特异性结合,将脂滴染成橘红色。细胞内脂滴的生成情况可以反映脂肪细胞的分化情况。染色结果显示，存在多个脂肪滴团块，脂肪滴呈橘色（图3）。3.5SEM扫描电镜结果分析：电镜结果显示，MWCNTs径向尺寸较小，管外径约在11.5-42.6nm之间（图4A），通过冷冻干燥方法，HA/Col/MWCNTs支架显示出高度相连的多孔结构，具有良好的穿通性，平均孔径大小约为100-150um，有助于营养物质的运输与细胞的生长与繁殖（图4B）。图3油红O染色结果，可见经成脂诱导后，细胞内呈橘色的脂肪滴团块（40X）


本文编号：3488387