A-PRF对人骨髓间充质干细胞体外增殖及成骨分化的影响

发布时间：2021-12-22 20:58

　　目的探讨改良型富含血小板纤维蛋白（Advanced platelet-rich fibrin,A-PRF）对人骨髓间充质干细胞（Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,HBMSCs）体外增殖及成骨分化的影响。方法在体外无菌条件下采集人骨髓血,根据干细胞易贴附于塑料底物的特性培养人骨髓间充质干细胞。细胞传代至第三代,通过细胞流式仪技术检测细胞来源,利用茜素红染色法鉴定细胞是否具有成骨分化潜能。A-PRF的制备:于志愿者肘静脉处采血10 mL,离心后获取A-PRF纤维蛋白凝块,放置于完全培养液中备用。含有不同浓度A-PRF的培养基培养细胞后采用噻唑蓝（methylthiazolyl diphenyltetrazolium bromide,MTT）法检测不同浓度A-PRF对人骨髓间充质干细胞的促增殖效应并筛选出促进细胞增殖的最佳浓度。含有10%A-PRF浓度的不同条件培养基培养细胞后分别采用碱性磷酸酶法（Alkaline phosphatase,ALP）、茜素红染色法检测A-PRF对人骨髓间充质干细胞不同时期的体外成骨分化的影响,采用实时荧光定量聚合... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HBMSCs表面抗原表达Figure.2-2Expressionofmesenchymal-associatedsurfacemarkersonHBMSCs

大学硕士学位论文 A-PRF 对人骨髓间充质干细胞体外增殖及成骨分BMSCs 成骨分化能力的鉴定 HBMSCs 在完全培养液培养 21 d 后经茜素红染色后可见培养 2-3a），研究级倒置荧光显微镜下可见少量矿化结节（图 2-3b培养液培养 21 d 后经茜素红染色后可见培养皿底呈鲜红色（置荧光显微镜下可见大量矿化结节（图 2-3d）。

“*”表示 p< 0.05，“**”表示 p< 0.01 4-1 MTT 检测不同浓度的 A-PRF 对 HBMSCs 增殖的影ects of normal culture medium treated with different concentrathe proliferation of HBMSCs.检测的结果 A-PRF 的正常培养液及成骨诱导培养液作用于 HBd 时检测 ALP 活性（图 4-2a）。ALP 活性在实验设定A-PRF 正常培养液组的 ALP 值明显高于正常培养液学差异（p< 0.01）。同时，含有 10%A-PRF 成骨诱于成骨诱导培养液组，两组比较有显著性统计学差4 d 时 A-PRF 促进 HBMSCs 成骨分化的作用更加显色的结果A-PRF 的正常培养液及成骨诱导培养液作用于 HB


本文编号：3547080