A-PRF/i-PRF对人牙龈成纤维细胞增殖分化作用的机制研究

发布时间：2022-01-13 01:11

　　目的研究A-PRF和i-PRF对人牙龈成纤维细胞（HGFs）增殖分化作用的机制,比较A-PRF和i-PRF生长因子的释放量（PDGF-BB、TGF-β1、EGF）以及A-PRF和i-PRF对HGFs增殖、迁移作用的影响。方法1.制备A-PRF及i-PRF均需抽取10ml静脉全血,以1500r/min离心14分钟得到A-PRF,以700r/min离心3分钟得到i-PRF,待A-PRF、i-PRF中的生长因子释放一周后,收集富含生长因子的培养液并配制A-PRF、i-PRF条件培养基。2.采用组织块贴壁法培养原代HGFs,选取对数生长期且生长状态良好的细胞进行实验,在倒置相差显微镜下观察细胞形态进行细胞形态学鉴定,通过鼠抗人波形蛋白染色及鼠抗人角蛋白染色进行细胞来源鉴定。3.通过酶联免疫吸附试验检测A-PRF、i-PRF在1、3、7天生长因子的释放量（EGF、PDGF-BB、TGF-β1）;分别使用A-PRF、i-PRF条件培养基培养HGFs 7天,通过qRT-PCR方法检测与软组织愈合相关基因的表达（COL1a2、FN1、TGF-β、PDGF）;通过细胞增殖实验及DAPI免疫荧光染色法,探... 

【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HGFs抗波形蛋白染色，×100

1 HGFs P0 代，×100 图 1.2 HGFs P3 代，×100 图 1.3 HGFs P3 代，Figure 1 HGFs ×1002 HGFs 的鉴定细胞贴壁生长，且为长梭形，从形态学上初步认定为 HGFs；鼠抗人波形蛋白（Vimentin）染色阳性，胞浆染为棕黄色，着色分布染为蓝色（如图 2.1 所示），鼠抗人角蛋白（cytokeratin）染色阴性被着色（如图 2.2 所示），结合细胞形态学鉴定，可判断细胞来源于中验所需的 HGFs。

兰州大学硕士学位论文 A-PRF/i-PRF 对人牙龈成纤维细胞增殖分化作用的机制研究4.2 实验结果4.2.1 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验结果显示，A-PRF 和 i-PRF 中均含有大量 EGF、PDGF-BB、TGF-β1，第 1 天到第 7 天的释放量逐渐减少，第 7 天的释放量仍然维持在一个较高水平，但 A-PRF 与 i-PRF 在 1、3、7 天生长因子的释放量存在一定差异(P＜0.05)（如图 3 所示）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]美学区域即刻种植中红色美学效果的影响因素[J]. 靳夏莹,仲维剑.  中国口腔种植学杂志. 2018(02)
[2]瓷贴面修复的研究现状及临床应用[J]. 孟玉坤,宗弋.  国际口腔医学杂志. 2017(01)
[3]粘接固定桥的固位及研究进展[J]. 陈西文,周进茹,朱智敏.  国际口腔医学杂志. 2016(05)
[4]单颗前牙即刻种植修复后的牙龈美学效果分析[J]. 安辉.  中国实用医药. 2016(24)
[5]不翻瓣技术在前牙即刻种植修复中的临床应用[J]. 冼逢珠,陈俊兰,吴纪楠.  口腔疾病防治. 2016(08)
[6]2种瓷贴面修复的临床疗效比较[J]. 陈润,江磊,于皓,郑明,程辉.  实用口腔医学杂志. 2016(04)
[7]纤维粘接桥修复单颗下切牙缺失伴邻牙松动的疗效观察[J]. 韩祺懿,张晖.  全科口腔医学电子杂志. 2016(08)
[8]富血小板血浆对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的影响[J]. 林颢,李鹏,孙杰聪,曾荣,楚佳奇.  广东医学. 2016(09)
[9]前牙即刻种植修复患者的牙龈乳头形态及骨吸收水平研究[J]. 刘志勇.  现代医学. 2016(01)
[10]牙釉质粘接技术在瓷贴面修复中的应用[J]. 罗新年,连文伟.  广东牙病防治. 2015(10)



本文编号：3585767