低强度脉冲超声波抑制髁突软骨下骨TGF-β1/Smad3通路改善颞下颌关节骨关节炎的研究
发布时间:2022-08-10 18:26
目的:颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorder,TMD)是口腔临床的常见病和多发病。颞下颌关节(temporomandibular joint,TMJ)骨关节炎(osteoarthrits,OA)是TMD最严重的类型,发病率较高,可引起患者关节区疼痛、摩擦音、开口受限、下颌运动障碍、面部畸形等,严重影响患者的生活质量。它是一种关节退行性疾病,主要病理特征为渐进性髁突软骨退变,并伴有滑膜和软骨下骨改变。TMJOA的病因非常复杂,炎症和软骨下骨异常重塑被认为是该疾病最重要的致病因素。近年来,虽然国内外学者对TMJOA的病因进行了广泛的研究,但尚无有效的治疗方法可以预防,阻止,或延迟该疾病的进展。治疗TMJOA,最理想的方法是改善关节腔炎症状态,阻断髁突软骨破坏,促进髁突软骨及软骨下组织的再生。目前TMJOA的治疗方法包括手术和非手术治疗。非手术治疗是最常用的治疗方法,包括药物治疗、物理治疗和咬合夹板等。大多数情况下,这些疗法能够比较有效的缓解症状,但是远期观察来看,对于关节结构的病理疗效并不理想。长期以来OA被认为是一种以关节软骨损伤为主的疾病,然而软骨下骨的...
【文章页数】:99 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 IL-1β诱导成骨细胞炎性效应对TGF-β1/Smad3通路的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 细胞来源
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 主要试剂制备
2.2.2 细胞培养
2.2.3 细胞分组处理
2.2.4 酶联免疫吸附测定法
2.2.5 荧光定量PCR法
2.2.6 免疫荧光染色法
2.2.7 免疫印迹法
2.3 数据处理
3 结果
3.1 IL-1β诱导对细胞分泌IL-6水平的影响
3.2 IL-1β诱导对细胞MMP-13、TGFβ1、Smad3 mRNA相对表达水平的影响
3.3 IL-1β诱导对细胞核pSmad3 荧光表达的影响
3.4 IL-1β诱导对细胞TGF-β1/Smad3 通路的影响
4 讨论
5 结论
第二部分 低强度脉冲超声波通过TGF-β1/Smad3 通路调控炎性效应的作用研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 细胞来源
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 si-TβRII的转染及效率检测
2.2.3 激动剂(SRI-011381)对TGF-β1/Smad3 通路的作用
2.2.4 细胞分组处理
2.2.5 LIPUS刺激
2.2.6 ELISA法
2.2.7 QPCR法
2.2.8 Western blotting法
2.3 数据处理
3 结果
3.1 si-TβRII转染效率
3.2 激动剂(SRI-011381)对TGF-β1/Smad3 信号通路的作用
3.3 细胞培养上清中IL-6的表达水平
3.4 LIPUS对 IL-1β诱导下细胞MMP-13、TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平的影响
3.5 LIPUS对 IL-1β诱导下细胞TGF-β1、pSmad3 蛋白表达水平的影响
3.6 LIPUS对 IL-1β诱导下转染细胞TGF-β1、Smad3、pSmad3 蛋白表达水平的影响
4 讨论
5 结论
第三部分 低强度脉冲超声波对兔颞下颌关节骨关节炎髁突软骨下骨改建和TGF-β1/Smad3 通路的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 主要试剂制备
2.2.2 实验分组和兔TMJOA模型的建立
2.2.3 LIPUS治疗
2.2.4 操作方法
2.2.5 处死与取材
2.2.6 Micro-CT扫描
2.2.7 组织切片制备
2.2.8 番红O染色
2.2.9 TRAP染色
2.2.10 免疫组织化学染色
2.2.11 Western blotting法
2.3 数据处理
3 实验结果
3.1 Micro-CT
3.2 番红O染色
3.3 TRAP染色
3.4 免疫组织化学染色
3.5 Western blotting
4 讨论
5 结论
本论文创新性的自我评价
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历
本文编号:3674133
【文章页数】:99 页
【学位级别】:博士
【文章目录】:
摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 IL-1β诱导成骨细胞炎性效应对TGF-β1/Smad3通路的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 细胞来源
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 主要试剂制备
2.2.2 细胞培养
2.2.3 细胞分组处理
2.2.4 酶联免疫吸附测定法
2.2.5 荧光定量PCR法
2.2.6 免疫荧光染色法
2.2.7 免疫印迹法
2.3 数据处理
3 结果
3.1 IL-1β诱导对细胞分泌IL-6水平的影响
3.2 IL-1β诱导对细胞MMP-13、TGFβ1、Smad3 mRNA相对表达水平的影响
3.3 IL-1β诱导对细胞核pSmad3 荧光表达的影响
3.4 IL-1β诱导对细胞TGF-β1/Smad3 通路的影响
4 讨论
5 结论
第二部分 低强度脉冲超声波通过TGF-β1/Smad3 通路调控炎性效应的作用研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 细胞来源
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 si-TβRII的转染及效率检测
2.2.3 激动剂(SRI-011381)对TGF-β1/Smad3 通路的作用
2.2.4 细胞分组处理
2.2.5 LIPUS刺激
2.2.6 ELISA法
2.2.7 QPCR法
2.2.8 Western blotting法
2.3 数据处理
3 结果
3.1 si-TβRII转染效率
3.2 激动剂(SRI-011381)对TGF-β1/Smad3 信号通路的作用
3.3 细胞培养上清中IL-6的表达水平
3.4 LIPUS对 IL-1β诱导下细胞MMP-13、TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平的影响
3.5 LIPUS对 IL-1β诱导下细胞TGF-β1、pSmad3 蛋白表达水平的影响
3.6 LIPUS对 IL-1β诱导下转染细胞TGF-β1、Smad3、pSmad3 蛋白表达水平的影响
4 讨论
5 结论
第三部分 低强度脉冲超声波对兔颞下颌关节骨关节炎髁突软骨下骨改建和TGF-β1/Smad3 通路的影响
1 前言
2 材料与方法
2.1 试剂和仪器
2.1.1 实验动物
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要仪器设备
2.2 实验方法
2.2.1 主要试剂制备
2.2.2 实验分组和兔TMJOA模型的建立
2.2.3 LIPUS治疗
2.2.4 操作方法
2.2.5 处死与取材
2.2.6 Micro-CT扫描
2.2.7 组织切片制备
2.2.8 番红O染色
2.2.9 TRAP染色
2.2.10 免疫组织化学染色
2.2.11 Western blotting法
2.3 数据处理
3 实验结果
3.1 Micro-CT
3.2 番红O染色
3.3 TRAP染色
3.4 免疫组织化学染色
3.5 Western blotting
4 讨论
5 结论
本论文创新性的自我评价
参考文献
综述
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历
本文编号:3674133
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