热疗对口腔鳞癌Cal27细胞Id-1表达影响的实验研究

发布时间：2022-08-13 10:22

　　目的:通过观察Cal27细胞增殖活性、迁徙能力及相关细胞因子表达的变化,探讨热疗对口腔鳞癌细胞Id-1表达水平的影响及机制。方法:1.Cal27细胞用含10%胎牛血清、1640培养基,在37℃、5%CO2培养箱中培养。用0.25%胰蛋白酶（含EDTA）消化收集Cal27细胞。用配置好的冻存液1ml将细胞冻存。采用倒置显微镜观察细胞的形态。2.采用CCK-8实验方法用450nm波长分别检测43℃热疗1小时后0h、2h、4h、8h、12h各时间点实验组与对照组细胞光密度值（OD）,标记实验组与对照组细胞的生长曲线,运用t检验计算各时间点实验组与对照组差异是否具有统计学意义。3.采用划痕实验分别于43℃热疗1小时后的0h、6h、12h、24h时间点观察实验组与对照组细胞向中间迁徙情况,利用Image J软件计算迁徙的面积并绘制折线图,运用t检验计算各时间点实验组与对照组差异是否具有统计学意义。4.将实验组对数期生长的细胞置于43℃培养箱培养1小时后继续标准条件培养4小时后用于PCR实验。对照组不做任何处理。用Trizol裂解液提取总RNA,将总RNA逆转录为c DNA,然后用Id-1和HSF... 

【文章页数】：75 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
材料与方法
    1 实验材料
        1.1 细胞培养
        1.2 CCK-8实验试剂
        1.3 实时荧光定量PCR
        1.4 实验试剂的配制
    2 实验仪器
        2.1 主要实验仪器
        2.2 主要实验用品
    3 实验方法
        3.1 细胞培养
        3.2 细胞传代
        3.3 细胞冻存
        3.4 细胞复苏
        3.5 细胞形态学观察
        3.6 CCK-8实验步骤
        3.7 划痕实验步骤
        3.8 qRT-PCR
        3.9 统计学分析
结果
    1 Cal27细胞系的形态观察
    2 CCK-8检测细胞增殖活性情况
    3 划痕实验检测细胞迁徙能力
    4 热疗前后Cal27细胞中Id-1、HSF1的mRNA表达变化
        4.1 RNA浓度、纯度测定
        4.2 qRT-PCR检测Id-1、HSF1的mRNA表达水平
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
病例
攻读学位期间的研究成果
缩略词表(附录)
致谢



本文编号：3676851