外泌体miR-512-3p通过下调Gas2促进TSCC细胞增殖的研究

发布时间：2023-02-25 21:14

　　目的探讨舌鳞状细胞癌(TSCC)患者唾液外泌体对TSCC细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法采用差速超速离心法收集舌癌患者和健康对照者唾液外泌体。用透射电镜和Western blot鉴定收集得到的沉淀。将唾液外泌体与TSCC细胞共培养,检测细胞增殖、GAS2和外泌体中微RNA-512-3p(miR-512-3p)的表达变化,并验证GAS2为miR-512-3p的靶基因。结果透射电镜和Western blot检测结果显示,提取的外泌体符合其结构特征和生物学特征。噻唑蓝(MTT)法检测结果显示,相比于对照组,TSCC组患者唾液外泌体明显促进TSCC细胞增殖(P<0.05)。Western blot结果显示,TSCC组患者唾液外泌体中cylinD1和增殖细胞核抗原(PCNA)表达水平明显升高(P<0.05);qPCR结果显示,TSCC患者唾液外泌体中miR-512-3p水平较健康对照者明显升高(P <0.001),并且miR-512-3p过表达组的外泌体可明显促进细胞增殖(P <0.05),其细胞p53表达水平降低(P<0.001)。荧光素酶报告基因检测结果显示...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 主要仪器与试剂
        1.1.2 唾液采集
    1.2 方法
        1.2.1 外泌体提取和鉴定
        1.2.2 细胞培养
        1.2.3 质粒转染
        1.2.4 无外泌体培养基配制
        1.2.5 Western blot
        1.2.6 透射电镜观察外泌体形态
        1.2.7 外泌体miRNA提取及RT-qPCR
        1.2.8 噻唑蓝（MTT）试验
        1.2.9 荧光素酶报告基因分析
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 外泌体鉴定
    2.2 TSCC患者唾液外泌体促进CAL27细胞增殖
    2.3 TSCC患者唾液外泌体miR-512-3p高表达
    2.4 外泌体通过miR-512-3p促进CAL27细胞增殖
    2.5 GAS2为miR-512-3p靶基因
3 讨论



本文编号：3749207