TCDD致胎鼠腭裂模型中miR-381-3p对腭骨分化影响和细胞周期分子表达变化的实验研究

发布时间：2024-03-21 23:22

　　第一部分TCDD致胎鼠腭裂miR-381-3p的下调抑制MEPM细胞成骨分化的实验研究目的:检测TCDD致胎鼠腭裂模型中miR-381-3p的表达变化,并探讨其是否与TCDD抑制胎鼠腭间充质细胞(mouse embryonic palatal mesenchymal(MEPM)cells)成骨分化相关。方法:使用随机数字表将32只孕鼠在胚胎日第10.5天(embryonic day10.5,E10.5)完全随机分为对照组和TCDD组,TCDD处理组在胚胎日第10.5天时,给予孕鼠TCDD(28μg/kg)一次性灌胃,对照组孕鼠同样根据体重给予相同体积的玉米油一次性灌胃。两组在E13.5和E14.5分别从孕鼠子宫内取出胎鼠剪取腭突组织,用于提取组织miRNAs和总蛋白。MEPM细胞在体外用含TCDD10nmol/L的完全培养基处理第0、0.5、1、2和3天后分别提取细胞miRNAs和总蛋白。MEPM细胞转染miR-381-3p抑制物(inhibitor)和模拟物(mimics)48h后分别提取细胞miRNAs和总蛋白。miR-381-3p在腭突组织和MEPM细胞中的相对表达量使用实时荧光...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1-1E13.4和E14.5对照组与TCDD组胎鼠腭部形态学表现（放大20倍）箭头指向腭中线

注：P表示完整腭部，表示两侧腭突间隙Pindicatethecompletefusionpalate,indicatethegapbetweentwosidepalates图1-1E13.4和E14.5对照组与TCDD组胎鼠腭部形态学表....

图1-2E13.4和E14.5时miR-381-3p在TCDD组和对照组(control)腭突组织的表达量

13.4和E14.5时miR-381-3p在TCDD组和对照组(control)腭突组织的表达量TCDD组与相同时间对照组比较P值＜0.05-2RelativeexpressionofmiR-381-3pinTCDDandcontrolgro....

图1-3E14.5时，RUNX2和OPN蛋白在TCDD组和对照组(control)腭突组织表达量

了解TCDD是否对腭骨发育有抑制作用。E14.5，TCDD组RUNX2蛋白在突表达量为0.69±0.06较对照组1.0±0.05下降（P＜0.05），OPN蛋白表6±0.03亦低于对照组1.0±0.03下降（P＜0.01）见图1-3。

图1-4TCDD(10nmol/L)处理MEPM细胞0、0.5、1、2和3天后miR-381-3p相对表达量变化

（P＜0.01）；第2天和第3天表达回升至对照组（第0天）水平甚至高（P＞0.05）。由此可见，MEPM细胞受到TCDD干扰后miR-381降后回升至正常水平。见图1-4。

本文编号：3934286