人涎腺腺样囊性癌中RUNX3的表达、甲基化状态及与肿瘤临床病理因素和预后之间的相关性研究

发布时间：2024-03-31 12:02

　　第一章：5-氮唑-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dc)对ACC-2、ACC-3和ACC-M细胞株RUNX3表达的影响 腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma，ACC)是涎腺中最为常见的恶性肿瘤之一，约占所有涎腺上皮性肿瘤的10％，其临床特点是生长缓慢，但侵袭性较强，易侵犯神经及血管，远处转移率高达40％。然而目前对该肿瘤的高侵袭性和远处转移的具体机制仍缺乏了解。人类Runt相关转录因子-3(human runt-related transcriptionfactor-3，RUNX3)是在胃癌中新发现的抑癌基因，由该基因甲基化引起的表达减少或缺失与胃癌的高侵袭性和远处转移密切相关，而在一些肿瘤细胞株中这种甲基化状态可以被DNA甲基化的逆转录酶5-氮唑-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dc)在体外环境中逆转。基于RUNX3基因与肿瘤转移的相关性，因而对RUNX3基因及蛋白在涎腺腺样囊性癌细胞株中的表达情况作一探讨。 实验一分别用RT-PCR、免疫荧光化学和Western blot检测ACC-2、ACC-3和ACC-M细胞在5-Aza-dc处理前后的RUNX3的表达 无菌条件...

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
致谢
中文摘要
英文摘要
缩略词中英文对照
主要实验设备和仪器
目录
引言
第一章 5-氮唑-2’-脱氧胞苷对ACC-2、ACC-3和ACC-M细胞株RUNX3表达的影响
    1.1 研究背景
    1.2 实验材料和方法
        1.2.1 实验材料
        1.2.2 细胞复苏和培养
        1.2.3 RT-PCR检测5-Aza-dc处理前后腺样囊性癌细胞株中RUNX3 mRNA的表达
        1.2.4 激光共聚焦检测5-Aza-dc处理前后腺样囊性癌细胞株中RUNX3蛋白的定位表达
        1.2.5 Western blot检测5-Aza-dc处理前后腺样囊性癌细胞株中RUNX3蛋白的表达
    1.3 实验结果
        1.3.1 RT-PCR结果
        1.3.2 激光共聚焦结果
        1.3.3 Western blot结果
    1.4 讨论
    参考文献
第二章 涎腺腺样囊性癌中RUNX3基因启动子CpG岛甲基化的演进规律和关键位点
    2.1 研究背景
    2.2 实验材料和方法
        2.2.1 标本获取及处理
        2.2.2 实时定量甲基化特异性PCR(qMSP)法检测RUNX3基因CpG岛10个位点甲基化状态
        2.2.3 Logistic ANOVA模型的建立
        2.2.4 Western blot检测腺样囊性癌和匹配正常涎腺组织RUNX3蛋白的表达
    2.3 实验结果
        2.3.1 Real-time qMSP结果及与临床病理因素的相关性
        2.3.2 Logistic ANOVA模型分析甲基化结果
        2.3.3 Western blot结果
        2.3.4 RUNX3基因甲基化、蛋白表达与临床病理因素之间的相关性
    2.4 讨论
    参考文献
第三章 RUNX3在涎腺腺样囊性癌和正常涎腺中的表达及与患者预后的相关性
    3.1 研究背景
    3.2 实验材料和方法
        3.2.1 荧光定量RT-PCR检测正常涎腺和腺样囊性癌组织中RUNX3 mRNA的表达
        3.2.2 RUNX3蛋白表达的免疫组织化学检测
        3.2.3 Western blot检测RUNX3蛋白的表达
    3.3 实验结果
        3.3.1 RUNX3 mRNA表达的荧光定量PCR结果
        3.3.2 RUNX3蛋白表达的免疫染色结果
        3.3.3 RUNX3蛋白表达的Western blot结果
        3.3.4 RUNX3蛋白表达的与临床病理特征的关系
        3.3.5 RUNX3蛋白表达的与患者预后的相关性
    3.4 讨论
    参考文献
全文总结
综述(一) RUNX3基因在肿瘤发生发展中的作用机制研究进展
    参考文献
综述(二) RUNX3蛋白胞浆异位表达在肿瘤形成中的作用机制研究进展
    参考文献
博士期间发表和待发表的论文
个人简介



本文编号：3943900