NF-κB对牙髓干细胞Jmjd3表达及成牙本质向分化的影响研究

发布时间：2024-05-19 18:47

　　目的:牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)是存在于牙髓组织中的未分化或低分化的成体干细胞,具有一定的增殖能力和分化潜能,在一定条件下,可分化为成骨细胞、成牙本质细胞样细胞、脂肪细胞、软骨细胞等。临床上深龋、磨损等慢性损伤诱导DPSCs迁移至损伤部位,分化成为成牙本质细胞样细胞,产生修复性牙本质以保护牙髓。组蛋白甲基化调控的表观遗传修饰在调控成骨分化方面起着重要作用,含十字形结构域蛋白-3(Jumonji domain-containing3,Jmjd3),是一种高度特异性的组蛋白去甲基化酶,主要功能是使组蛋白H3第27位赖氨酸残基(H3K27)脱甲基以激活基因转录。大量研究表明,Jmjd3调节多种细胞的成骨分化,但对Jmjd3是否参与DPSCs的成牙本质向分化了解甚少。NF-κB(Nuclear Factor-kappa B)是一种普遍存在的转录因子,广泛参与免疫、炎症、肿瘤、分化等生理病理过程。研究发现,NF-κB在炎症、肿瘤、创伤中可以诱导Jmjd3的表达,但其在分化中是否能调节Jmjd3的表达尚无报道。本研究以DPSCs为主要研究对象,检测Jmj...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料与方法
    2.1 材料与仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 DPSCs的分离提取
        2.2.2 细胞培养与成牙本质分化诱导
        2.2.3 流式细胞术
        2.2.4 成骨分化鉴定
        2.2.5 成神经分化鉴定
        2.2.7 ALP染色
        2.2.8 细胞转染
        2.2.9 RNA提取、反转录及q PCR
        2.2.10 Western Blot
    2.3 统计分析
3 实验结果
    3.1 DPSCs的提取及鉴定
        3.1.1 DPSCs的原代分离培养
        3.1.2 流式细胞术鉴定细胞表面标记物
        3.1.3 DPSCs多向分化
    3.2 Jmjd3在DPSCs成牙本质向分化过程中表达上调
        3.2.1 DPSCs向成牙本质细胞样细胞分化
        3.2.2 分化过程中Jmjd3的表达上调
    3.3 Jmjd3 活性抑制剂GSK-J4 抑制DPSCs的成牙本质向分化
        3.3.1 DSPP、DMP1 表达下调
        3.3.2 DPSCs的矿化水平降低
    3.4 NF-κB对 Jmjd3 表达及DPSCs成牙本质向分化的影响
        3.4.1 分化激活NF-κB信号通路
        3.4.2 BAY11-7082 促进Jmjd3 表达及DPSCs成牙本质向分化
        3.4.3 沉默NF-κB p65 促进Jmjd3 表达及DPSCs成牙本质向分化
4 讨论
5 结论
本研究创新性自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究结果
致谢
个人简历



本文编号：3978306