基于牙本质小管和牙本质无机成分的牙髓干细胞分化与极化研究
发布时间:2024-05-19 21:24
促进牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)分化与极化是组织工程牙再生的重要研究内容。在牙本质再生研究中,DPSCs的分化与极化决定了再生牙本质的组织结构,进而影响再生牙本质发挥机械性能和传导刺激信号等生理功能。目前尚缺乏有效促进DPSCs分化与极化的牙本质再生生物材料。在组织工程研究中,材料的微观形貌在调控种子细胞的生物学行为并影响再生组织的组织结构中发挥重要作用。具有管状微结构的材料因含有开放的通道并能诱导种子细胞生长和分化而被用于再生具有相似结构的组织。牙本质是一种含有密集排列的天然管状结构(牙本质小管)的硬组织,研究其管状结构在生理环境下的功能及其对DPSCs形态和功能的影响,将有望以牙本质为基础形成具有调控种子细胞形态和功能的生物材料,进而对组织工程牙本质再生产生重要意义。鉴于以上,在第二章中我们首先研究了生理环境下的牙本质管状结构在促进修复性牙本质形成中对药物的传导作用。实验将负载携带人BMP2基因的重组腺病毒(AdCMV-hBMP2)明胶海绵置于大鼠磨牙近髓窝洞内,观察牙本质小管传导AdCMV-hBMP2转染牙髓细胞的能力以及促进修复性牙本质...
【文章页数】:87 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
本文编号:3978479
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【学位级别】:博士
【部分图文】:
图2.1AdCMV-EGFP转染大鼠牙髓1天和3天后绿荧光蛋白的表达
图2.1AdCMV-EGFP转染大鼠牙髓1天和3天后绿荧光蛋白的表达。2.4.2AdCMV-hBMP2转染牙髓细胞促进修复性牙本质形成取实验组与对照组大鼠上颌骨,脱钙并常规HE切片观察。我们发现,在第7天时,实验组磨牙髓腔侧已经形成薄层修复性牙本质,其表面....
图2.2转染AdCMV-hBMP2和AdCMV-EGFP后髓腔内形成修复性牙本质的组织学表现
仅在牙本质髓腔侧表面小范围内形成了局灶性的修复性牙本质(图2.2A,E)。术后14天时,在实验组中所形成的修复性牙本质面积明显增加,以窝洞制备区域对应的髓角处最厚。可见牙本质小管形成,但数量较少,且排列紊乱(图2.2D,H)。在对照组中,髓角处形成的修复性牙本质也增多,....
图2.3牙髓暴露时转染AdCMV-hBMP2的大鼠牙髓表面修复性牙本质形成情况
验分别在第7天和第14天时通过HE切片观察大鼠髓腔内修复性牙本质形成的面积和组织形态。在转染第7天时,实验组髓腔侧已经出现新生的修复性牙本质层,这些牙本质中含有成牙本质细胞,为骨样牙本质。而对照组中仅在髓腔局部形成了少量修复性牙本质。这提示所转染的hBMP2已....
图3.1第二代DPSCs形态观察
3.2.10统计学分析本实验数据按照均数±标准差形式表示,采用单因素方差分析法进行统计学分析,以P<0.05为具有统计学意义。3.3实验结果3.3.1DPSCs培养与鉴定利用酶消化法联合倒置贴壁法分离DPSCs,在组织培养24小时后于培养瓶底即可见少量单细胞....
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