MiR-579-3p靶向肌动蛋白相关蛋白3B调控口腔鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的机制研究

发布时间：2024-05-19 21:50

　　目的 :探讨miR-579-3p对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法:培养正常人口腔角质形成细胞(normal human oral keratinocyte,NHOK)和OSCC细胞系CAL27、CAL33、SCC15,实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞中miR-579-3p和肌动蛋白相关蛋白3B(actin-related protein 3B,ACTR3B)信使RNA(mRNA)的表达水平,蛋白质印迹法(western blot)检测ACTR3B蛋白表达水平。以CAL33细胞为研究对象,构建过表达miR-579-3p或沉默ACTR3B表达的CAL33细胞,四甲基噻唑蓝染色法(methylthiazoletrazolium,MTT)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和活化的半胱天冬酶-3(C-caspase-3)蛋白水平。Starbase生物信息学软件预测ACTR3...

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图5Westernblot检测ACTR3B、CyclinD1、C-caspase-3蛋白表达

图4miR-579-3p靶向调控ACTR3B表达3讨论

图2过表达miR-579-3p对CAL33细胞增殖和凋亡的影响

Starbase软件预测显示，ACTR3B的3′UTR中含有与miR-579-3p互补的核苷酸序列，提示ACTR3B是miR-579-3p的靶基因（图4）。双荧光素酶活性检测结果显示，与miR-NC组比较，miR-579-3p组共转染WT-ACTR3B的荧光素酶活性降低（P<0.....

图4miR-579-3p靶向调控ACTR3B表达

与miR-579-3p+pcDNA-NC组比较，miR-579-3p+pcDNA-ACTR3B组CAL33细胞存活率和CyclinD1蛋白水平升高（P<0.05），细胞凋亡率和C-caspase-3蛋白水平降低（P<0.05）。详见表6和图5。图5Westernblot检测A....

图1Westernblot检测ACTR3B蛋白表达

与NHOK比较，口腔鳞癌细胞系CAL27、CAL33和SCC15中miR-579-3p表达水平降低（P<0.05),ACTR3BmRNA和蛋白表达水平升高（P<0.05）。选择CAL33细胞为研究对象，进行后续研究。详见图1和表1。2.2过表达miR-579-3p对口腔鳞癌C....

本文编号：3978506