D-甲硫氨酸通过降低c-di-GMP分散牙龈卟啉单胞菌生物膜的研究

发布时间：2024-05-23 06:22

　　目的:本研究旨在探讨D-甲硫氨酸可能通过影响c-di-GMP的形成而分散牙龈卟啉单胞菌生物膜的作用机制,为牙周炎和种植体周围炎的治疗提供新的策略。方法:D-甲硫氨酸以不同浓度(0、5、10、15、20、25、30、35、40、45m M)溶解于细胞培养基和细菌培养基,通过CCK-8细胞增殖实验获得对小鼠成纤维细胞无细胞毒性的D-甲硫氨酸浓度范围。通过生长曲线、最小抑菌浓度实验(Minimum inhibitory concentration,MIC)、最小杀菌浓度实验(Minimum bactericidal concentration,MBC)评估D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌细菌活性的影响;通过结晶紫染色实验、胞外多糖实验和扫描电镜(Scanning Electron Microscope,SEM)评估D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜形成的抑制作用和成熟生物膜的裂解作用。通过高效液相色谱仪检测D-甲硫氨酸作用后,牙龈卟啉单胞菌生物膜内c-di-GMP的含量,探讨D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜的作用机制。结果:1.D-甲硫氨酸≤40m M时,对L929细胞增殖无影响。2.D-甲硫...

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
前言
中文摘要
ABSTRACT
文中常用缩写中英文对照
第1章 引言
    1.1 牙周炎与种植体周围炎的致病因素
    1.2 牙龈卟啉单胞菌的致病性
    1.3 D-氨基酸对细菌和细菌生物膜的影响
    1.4 本课题的研究目的
第2章 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 细胞和菌种来源
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 D-甲硫氨酸细胞培养基和细菌培养基的配制
        2.2.2 D-甲硫氨酸对小鼠成纤维细胞增殖的影响
        2.2.3 D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌细菌活性的影响
        2.2.4 结晶紫染色评估不同浓度D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜生物量的影响
        2.2.5 胞外多糖实验评估不同浓度D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜胞外多糖的影响
        2.2.6 扫描电子显微镜观察牙龈卟啉单胞菌形态及生物膜结构
        2.2.7 D-甲硫氨酸对成熟的牙龈卟啉单胞菌生物膜的作用
        2.2.8 D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜内c-di-GMP的影响
        2.2.9 数据分析
第3章 实验结果
    3.1 D-甲硫氨酸对L929细胞增殖的影响
    3.2 不同浓度D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜形成的抑制作用
        3.2.1 不同浓度D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌细菌活性的影响
        3.2.2 结晶紫染色法评估D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜生物量的影响
        3.2.3 胞外多糖实验评估不同浓度D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜胞外多糖的影响
        3.2.4 扫描电子显微镜观察D-甲硫氨酸作用下牙龈卟啉单胞菌形态及生物膜的结构
    3.3 D-甲硫氨酸对成熟牙龈卟啉单胞菌生物膜的裂解作用
        3.3.1 结晶紫染色法评估D-甲硫氨酸对成熟牙龈卟啉单胞菌生物膜生物量的影响
        3.3.2 胞外多糖实验评估 D-甲硫氨酸对成熟牙龈卟啉单胞菌生物膜
        3.3.3 扫描电子显微镜观察D-甲硫氨酸作用下牙龈卟啉单胞菌生物膜的结构及形态变化
    3.4 D-甲硫氨酸对牙龈卟啉单胞菌生物膜内c-di-GMP的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢



本文编号：3981117