外泌体对老龄小鼠骨髓间充质干细胞衰老影响的初步研究

发布时间：2025-03-14 23:10

　　 目的 :初步探讨外泌体(exosome)对老龄小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs衰老的影响。方法:提取年轻小鼠BMSCs来源的外泌体,作用于老龄小鼠BMSCs,并观察其衰老现象的改变;分别提取年轻小鼠和老龄小鼠BMSCs来源的外泌体,进行基因芯片分析,初步筛选并验证表达差异性较大的微小RNA(microRNAs,miRNAs)在老龄小鼠BMSCs衰老过程中的作用。结果:年轻小鼠BMSCs来源的外泌体作用于老龄小鼠BMSCs后,其衰老情况得到明显改善。芯片分析结果显示,miR-199a-3p和miR-214-3p表达的差异性最为明显,其中老龄小鼠BMSCs转染miR-199a-3p-mimics后,可明显缓解其衰老状态。结论:年轻小鼠BMSCs来源的外泌体可明显减缓老龄小鼠BMSCs的衰老情况,外泌体中所含的miR-199a-3p可能在缓解细胞衰老过程中起到了重要的调节作用,但其具体机制有待进一步研究。

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【部分图文】：

图4 BMSCs来源外泌体miRNAs热图

图3年轻小鼠BMSCs来源外泌体对衰老BMSCs的影响3讨论

图1 外泌体鉴定

外泌体鉴定方式主要有电镜检测、粒径检测、表面标志蛋白检测等（图1）。透射电镜扫描下观察到囊泡为纳米级囊泡，囊泡复染后呈深色，直径在20～200nm（图1A）；经粒径测量分析所得，囊泡直径均值为146.4nm，粒径主峰为130.2nm，直径在20～200nm的囊泡百分比为9....

图2 外泌体绿色荧光标记表达情况

将年轻小鼠BMSCs来源外泌体添加至老龄小鼠BMSCs的完全培养基中，培养3h后，显微镜下观察到老龄小鼠的BMSCs内开始出现绿色荧光，12h后，荧光强度显著性增加，几乎所有细胞内都能观察到绿色荧光标记的外泌体，而在对照组的BMSCs中没有出现绿色荧光信号（图2）。结果表明，....

图3 年轻小鼠BMSCs来源外泌体对衰老BMSCs的影响

根据“2.4”的结果，我们进一步改变老龄小鼠BMSCs细胞内2个miRNAs的表达量，初步探究miR-199a-3p、miR-214-3p对老龄小鼠BMSCs衰老的影响。利用miR-199a-3pmimics和miR-214-3pmimics分别转染老龄小鼠来源的BMSCs....

本文编号：4034762