Golli-MBP影响T细胞与口腔黏膜组织细胞生物学功能的体内外实验研究

发布时间：2017-08-19 04:26

  本文关键词：Golli-MBP影响T细胞与口腔黏膜组织细胞生物学功能的体内外实验研究

  更多相关文章： 少突胶质细胞谱系基因-髓鞘碱性蛋白 钙离子 增殖 凋亡 动物模型

【摘要】：目的：研究少突胶质细胞谱系基因-髓鞘碱性蛋白(Genes of the Oligodendrocyte lineage-Myelin Basic Protein, Golli-MBP)对T细胞胞内Ca2+及凋亡、增殖能力的影响,初步尝试建立口腔扁平苔藓(Oral lichen planus, OLP)动物模型,从而为进一步研究OLP等免疫相关性疾病的病因及发病机制打下基础。方法：Golli-MBP过表达慢病毒载体感染Jurkat细胞,采用实时荧光定量PCR(quantitative real time PCR, qPCR)和免疫蛋白印记技术(western blot, WB)分析Golli-MBP mRNA及蛋白表达情况；CCK-8法和Annexin V/FITC 7-AAD双荧光染色分别检测Jurkat细胞增殖能力、凋亡能力；采用钙离子荧光探针Fluo-3检测Jurkat细胞内Ca2+浓度变化；Golli-MBP过表达慢病毒载体注射于叙利亚金黄地鼠颊囊黏膜下,HE染色观察叙利亚金黄地鼠口腔黏膜组织结构改变；免疫组化法观察叙利亚金黄地鼠口腔黏膜组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)的表达；TUNEL法观察叙利亚金黄地鼠口腔黏膜组织细胞凋亡情况。结果：Golli-MBP过表达慢病毒载体成功感染Jurkat细胞,感染后Jurkat细胞Golli-MBP mRNA及蛋白表达升高；Golli-MBP OE组Jurkat细胞增殖能力显著下降(p0.01),凋亡能力也明显下降(p＜0.01); Golli-MBP OE组钙离子内流显著减小(p＜0.01); Golli-MBP未能诱导实验动物口腔黏膜产生肉眼可见的OLP病损变化；HE染色未见OLP特征性组织学结构改变；7天实验组上皮层细胞凋亡率与对照组无明显差异(p0.05),14天实验组上皮层细胞凋亡率低于对照组,差异具有统计学意义(p0.05)；7天及14天实验组上皮层细胞增殖率低于对照组,差异具有统计学意义(p0.05)。结论：Golli-MBP过表达可抑制Jurkat细胞增殖、凋亡能力和抑制Ca2+内流,且能够调控叙利亚金黄地鼠颊囊黏膜上皮细胞增殖和凋亡,但未能成功建立OLP动物模型。
【关键词】：少突胶质细胞谱系基因-髓鞘碱性蛋白 钙离子 增殖 凋亡 动物模型
【学位授予单位】：南京医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781.5
【目录】：

• 缩略词表7-9
• 中文摘要9-10
• 英文摘要10-12
• 前言12-15
• 第一部分 GOLLI-MBP过表达慢病毒载体对T细胞内钙离子的影响15-29
• 1 材料和方法15-24
• 2 结果24-27
• 3 讨论27-29
• 第二部分 GOLLI-MBP过表达慢病毒载体对T细胞凋亡、增殖能力的影响29-34
• 1 材料和方法29-30
• 2 结果30-32
• 3 讨论32-34
• 第三部分 GOLLI-MBP过表达慢病毒载体介导建立口腔扁平苔藓动物模型的实验初探34-45
• 1 材料和方法34-39
• 2 结果39-43
• 3 讨论43-45
• 总结45-47
• 参考文献47-52
• 文献综述52-60
• 参考文献57-60
• 攻读学位期间发表文章情况60-61
• 南京医科大学研究生成绩单61-62
• 致谢62

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前8条

1 尚云峰,柳志文,付本燕,黎逢保,陈剑声,李凤娥;口腔黏膜扁平苔藓患者口腔黏膜组织中cyclin D_1,ki-67及凋亡的表达研究[J];口腔医学;2005年01期

2 吴彬;刘玮玮;史培荣;解军;郝梅;武云霞;陈显久;;口腔黏膜组织癌变趋势的判别[J];中华实用诊断与治疗杂志;2012年04期

3 周红梅,杨娅,周敏,郑晓晖,王智,何志秀,李秉琦;口腔黏膜组织结构及DNA损伤修复功能的增龄性变化[J];华西口腔医学杂志;2003年03期

4 李宏卫,温玉明;口腔黏膜组织工程的研究[J];口腔医学;2005年01期

5 李海如;华春清;吴蕾;张涛;唐梦霓;;应用口腔修复膜修复口腔黏膜组织术后缺损[J];中华全科医学;2011年12期

6 孙凤娟;倪雪娇;;52例口腔黏膜组织缺损患者行异种脱细胞真皮基质修复的护理[J];护理学报;2013年18期

7 李春艳;高文信;周延民;张茹慧;赵静辉;李艳秋;;口腔鳞状细胞癌组织中死亡相关蛋白激酶的甲基化及其蛋白的表达[J];吉林大学学报(医学版);2009年02期

8 ;[J];;年期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 廖馨;Golli-MBP影响T细胞与口腔黏膜组织细胞生物学功能的体内外实验研究[D];南京医科大学;2016年

，

本文编号：698680