变异链球菌自诱导物2信号分子的体外合成与活性检测

发布时间：2017-08-24 16:01

  本文关键词：变异链球菌自诱导物2信号分子的体外合成与活性检测

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【摘要】：目的利用分子生物学的相关技术体外合成具有良好生物学活性的自诱导物2(AI-2)信号分子,为进一步研究S-核糖高半胱氨酸裂解酶(Lux S)/AI-2信号系统对于变异链球菌和口腔生物膜的致病性、耐药性的调节机制奠定基础。方法构建稳定高效的Lux S和S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(Pfs)原核表达载体,异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白,并进行镍柱层析分离纯化与鉴定。利用纯化表达的Lux S蛋白和Pfs蛋白体外合成AI-2信号分子,以哈维氏弧菌菌株BB170作为报告菌株,通过生物发光效应检测体外合成的变异链球菌AI-2信号分子的生物活性,并以此间接检测Lux S蛋白和Pfs蛋白的生物学活性。结果体外合成的AI-2可诱导哈维氏弧菌菌株BB170强烈发光。以变异链球菌UA159标准株菌液中自然生成的AI-2为对照,体外合成AI-2诱导发光效果强于菌液。结论体外合成的AI-2具有良好的生物学活性,获得了高效表达、可溶性的Lux S和Pfs重组蛋白。
【作者单位】： 解放军第451医院口腔科;
【关键词】： 变异链球菌 密度感应系统 自诱导物 S-核糖高半胱氨酸裂解酶蛋白
【分类号】：R780.2
【正文快照】： 群体感应(quorum sensing,QS)是使用可溶性小分子在细胞间进行信号传递,根据种群密度调节细胞生理行为的过程。自诱导物2(autoinducer-2,AI-2)介导的QS是唯一被革兰氏阳性和阴性菌共用的QS系统,AI-2合成酶S-核糖高半 胱氨酸裂解酶(S-ribosylhomocysteinase,Lux S)广泛分布于

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本文编号：732189