IL-17A对成牙骨质细胞凋亡及氧化应激反应的实验研究
本文关键词:IL-17A对成牙骨质细胞凋亡及氧化应激反应的实验研究
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【摘要】:目的:通过IL-17A干预OCCM-30,探讨IL-17A在牙根吸收修复过程中的作用,以期为临床上正畸治疗中防止牙根吸收提供实验依据。方法:将OCCM-30细胞置于细胞培养箱内培养,将其分为6组:实验组5组和对照组1组。实验组分别用含10ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml、40 ng/ml、50 ng/ml IL-17A的培养液处理细胞,对照组使用不含IL-17A的完全培养液,进行如下检测:1、细胞增殖与活性的检测IL-17A处理细胞24h、48h、72h后,分别用细胞增殖与活性检测(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力;2、细胞凋亡的检测IL-17A处理细胞48h后,用流式细胞术(FCM)检测各组细胞凋亡情况,并统计凋亡率;3、细胞内活性氧(ROS)水平的检测IL-17A处理细胞48h后,用FCM检测各组细胞内ROS水平。结果:1、细胞增殖的检测IL-17A作用OCCM-30 24h后,不同浓度梯度的实验组吸光度值与对照组比较差异均无统计学意义(P0.05)。而在IL-17A作用48h和72h后,OCCM-30吸光度值呈浓度依赖性降低,差异有明显统计学意义(P0.01)。2、细胞凋亡的检测在IL-17A作用OCCM-30 48h后,细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率与对照组相比显著升高,差异具有明显统计学意义(P0.01),其中50ng/ml的浓度组早期凋亡率和晚期凋亡率最高,与IL-17A的浓度呈正比。3、细胞内ROS水平检测在经过IL-17A作用OCCM-30 48h后各实验组细胞内ROS水平均有升高,其中10ng/ml的浓度组细胞内ROS含量高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);20、30、40、50ng/ml浓度组的细胞内ROS含量明显高于对照组,呈浓度依赖性升高,差异有明显统计学意义(P0.01)。结论:1、IL-17A在10-50ng/ml的范围内可抑制OCCM-30增殖,并且随浓度的升高,药物抑制细胞增殖的作用更明显,呈浓度依赖性。2、IL-17A在10-50ng/ml的范围内对OCCM-30有明显的促凋亡作用,细胞凋亡率随IL-17A浓度的增加呈浓度依赖性升高。3、IL-17A能诱导OCCM-30细胞ROS的产生,细胞内ROS水平随IL-17A浓度的增加呈浓度依赖性升高。综上所述,IL-17A可能是通过促使OCCM-30细胞发生氧化应激反应,使细胞内ROS水平升高,从而促进细胞凋亡,抑制细胞增殖。
【关键词】:IL-17A OCCM-30 细胞凋亡 氧化应激
【学位授予单位】:南昌大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R783.5
【目录】:
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-9
- 中英文缩略词表9-10
- 第1章 引言10-12
- 第2章 材料与方法12-17
- 2.1 主要材料与仪器12-13
- 2.1.1 主要试剂及来源12
- 2.1.2 仪器及设备12-13
- 2.1.3 药物的配制13
- 2.2 实验方法13-16
- 2.2.1 OCCM-30 细胞培养13-14
- 2.2.2 技术路线图14-15
- 2.2.3 CCK-8 检测OCCM-30 细胞增殖15
- 2.2.4 流式细胞术检测OCCM-30 的凋亡15-16
- 2.2.5 OCCM-30 细胞内活性氧(ROS)水平检测16
- 2.3 统计分析16-17
- 第3章 结果17-21
- 3.1 不同浓度IL-17A对OCCM-30 增殖的抑制作用17-18
- 3.2 不同浓度IL-17A对OCCM-30 凋亡的促进作用18-20
- 3.3 不同浓度IL- 17 对OCCM-30 氧化应激的促进作用20-21
- 第4章 讨论21-25
- 4.1 成牙骨质细胞的选择21-22
- 4.2 IL-17A与牙根吸收22
- 4.3 氧化应激与细胞凋亡22-23
- 4.4 IL-17A对OCCM-30 增殖能力的抑制作用23-24
- 4.5 IL-17A对OCCM-30 凋亡的促进作用24
- 4.6 IL-17A对OCCM-30 氧化应激的促进作用24-25
- 第5章 结论与展望25-26
- 5.1 结论25
- 5.2 展望25-26
- 致谢26-27
- 参考文献27-31
- 病例报告31-52
- 综述52-60
- 参考文献58-60
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,本文编号:808291
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