基质衍生细胞因子-1α诱导内源性细胞归巢进行牙髓再生的研究
发布时间:2017-09-12 23:43
本文关键词:基质衍生细胞因子-1α诱导内源性细胞归巢进行牙髓再生的研究
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【摘要】:目的:通过在根管内植入基质衍生细胞因子-1α (stromal cell derived factor-1α, SDF-1α)组织学评价根管在皮下异位和颌骨原位两种不同组织生理学环境下SDF-1α诱导内源性细胞进入根管的趋化能力,并观察根管内再生组织的组织学结构,探讨SDF-1α诱导内源性细胞归巢并参与牙髓再生的可行性,为非细胞移植的牙髓再生寻找新途径。方法:1.皮下异位实验;临床收集因正畸需要拔除的前磨牙,制备成长5mm的牙根段,实验组牙根段根管内植入复合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝胶胶原支架,对照组牙根段根管内仅植入多肽水凝胶胶原支架。选取6-8周龄15只免疫缺陷小鼠(裸鼠),背部作一1cm长纵行切口,钝性分离皮下组织,每只裸鼠背部左右两侧分别各植入一对照组、实验组牙根段样本,6周后取材,对样本进行组织学观察。2.颌骨原位实验:选取10-12月龄中华田园犬3只,建立犬恒牙无髓根管模型。每只实验犬上颌6颗前牙随机分成两组,实验组根管内植入复合100ng/mL SDF-1α的多肽水凝胶胶原支架,对照组根管内仅植入多肽水凝胶胶原支架,冠部均采用MTA+玻璃离子双层严密封闭。术后6周处死动物、取材,苏木精-伊红(hematine-eosine, HE)染色及免疫组织化学染色检测DSPP和CD34在再生组织内的表达情况。结果:1.收集植入裸鼠背部的牙根段样本,实验组根管开放端见红色组织再生,HE染色观察实验组牙根段根管内有大量细胞和血管形成,细胞呈长梭形成纤维细胞样,细胞形态清晰,胞核小而细长,着色深。根管内见管腔形态不规则的血管样组织形成,内含红细胞,并可见少量的上皮细胞。对照组牙根段内见均质疏松状物质,未见细胞、血管等组织结构。2.收集实验犬实验样本,HE染色显微镜下可见实验组根管腔内生成含大量细胞和血管的疏松结缔组织。根管内细胞形态呈长梭形,类似成纤维细胞样形态,胞核小而细长,着色深,胞质较少,并贴附于天然牙本质壁。根管内新生血管样组织可见管腔形态不规则,内皮细胞衬于管腔内侧。对照组HE染色显微镜下观察根管腔内见均质疏松状物质,未见细胞、血管等组织结构。DSPP抗体免疫组织化学染色镜下观察显示,实验组根管内牙髓样新生组织中细胞胞浆呈棕色阳性表达。CD34抗体免疫组织化学染色镜下观察显示,实验组根管内血管样新生组织内衬细胞染色呈棕色阳性表达。结论:1.根管预备后管腔内植入SDF-1α,在皮下异位环境下SDF-1α具有诱导内源性细胞归巢的能力。2.颌骨原位根管中植入SDF-1α可诱导内源性细胞归巢进入根管并诱导牙髓样组织再生。3. SDF-1α诱导内源性细胞归巢进入根管的生物学活性有望为非细胞移植的牙髓再生治疗提供思路。
【关键词】:基质衍生细胞因子-1 α 牙根段 裸鼠 犬无髓根管模型 细胞归巢 牙髓再生
【学位授予单位】:广西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R781
【目录】:
- 个人简历4-6
- 英文缩略词表6-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-12
- 前言12-16
- 实验一 根管管腔中基质衍生细胞因子-1α诱导内源性细胞归巢的研究16-28
- 1、材料与方法16-21
- 2、结果21-24
- 3、讨论24-27
- 4、小结27-28
- 实验二 基质衍生细胞因子-1 α诱导内源性细胞归巢进行牙髓再生的原位研究28-40
- 1、材料与方法28-32
- 2、结果32-37
- 3、讨论37-40
- 4、小结40
- 结论40-41
- 参考文献41-46
- 文献综述46-67
- 综述参考文献56-67
- 致谢67-68
- 攻读学位期间发表的论文68
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