伊犁黑蜂蜂胶对变形链球菌属及其生物膜代谢影响的实验研究

发布时间：2017-09-25 00:34

  本文关键词：伊犁黑蜂蜂胶对变形链球菌属及其生物膜代谢影响的实验研究

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【摘要】：目的：通过比较伊犁黑蜂蜂胶乙醇提取物(Ethanol extract of Propolis EEP)与氟化钠对致龋变形链球菌属产酸,产糖代谢关键酶乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenaseLDH)与葡萄糖基转移酶(Glycosyltransferase GTFs)及其相关基因表达的影响来探讨其对变形链球菌属代谢影响机制。方法：分别培养游离状态与生物膜状态下生长的变形链球菌、远缘链球菌；并以含梯度浓度EEP的脑心浸液培养基(Brian Heart InfusionBHI),50mg/L NaF的BHI培养基,不含药物的BHI培养基分别作为实验组,阳性对照组与阴性对照组与不同生长状态的目的细菌作用18小时,①通过还原性辅酶Ⅰ氧化法测定乳酸脱氢酶活性。②通过硫酸铵盐析结合超滤离心法提取GTFs粗酶,蒽酮法测定GTFs活性。③RT-qPCR法测定各组LDH编码基因ldh表达。④RT-qPCR法测定各组GTFs编码基因gtfB、gtfC、gtfD表达。结果：①在游离状态与生物膜状态下,变形链球菌、远缘链球菌各实验组和NaF组LDH活性均明显受到抑制(P0.05)。②在游离状态和生物膜状态下,EEP组,NaF组变形链球菌GTFs活性没有变化(P0.05)③游离状态时,变形链球菌,远缘链球菌实验组组和NaF组ldh表达明显受到抑制(P0.05)；生物膜状态下,变形链球菌实验组在MBEC、1/2MBEC、 1/4MBEC浓度时ldh表达受到抑制(P0.05),远缘链球菌实验组在MBEC、1/2MBEC、 1/4MBEC、1/8MBEC浓度时ldh表达受到抑制(P0.05),两种细菌NaF组ldh表达差异没有统计学意义(P0.05)。④游离状态与生物膜状态下,变形链球菌实验组gtfB、 gtfC、gtfD基因表达与阴性对照组没有差异(P0.05)。游离与生物膜生长状态变形链球菌NaF组对gtfB基因表达有抑制作用(P0.05)。结论：伊犁黑蜂蜂胶能够抑制游离生长状态与生物膜生长状态下变形链球菌、远缘链球菌乳酸脱氢酶活性及其编码基因ldh表达,来抑制细菌产酸；伊犁黑蜂蜂胶对游离生长状态和生物膜生长状态变形链球菌葡萄糖基转移酶及其编码基因没有作用。伊犁黑蜂蜂很可能是通过抑制产酸代谢途径乳酸脱氢酶活性及其转录来抑制变形链球菌产酸,从而达到防龋的效果。
【关键词】：蜂胶 变形链球菌属 乳酸脱氢酶 葡萄糖基转移酶 荧光定量PCR
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R781.1

【参考文献】

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1 彭志庆;国产水溶性蜂胶对主要致龋链球菌及其耐氟菌株致龋性的影响[D];重庆医科大学;2010年

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本文编号：914366