茄尼醇对大鼠实验性牙周炎抗炎抗氧化作用研究

发布时间：2017-09-28 10:05

  本文关键词：茄尼醇对大鼠实验性牙周炎抗炎抗氧化作用研究

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【摘要】：[目的]通过建立体内外炎症模型探讨茄尼醇对大鼠实验性牙周炎抗炎抗氧化作用研究。[方法]1.体内实验：126只健康雄性SD大鼠随机分为正常组(N组,18只),牙周炎建模组108只。通过双侧上颌第二磨牙丝线结扎配合黏性高糖饮食4周建立牙周炎模型。成模后,牙周炎大鼠再随机分为牙周炎组(P组)、替硝唑组(T组)、维生素C组(VitC组)、茄尼醇低剂量组(S1)、中剂量组(S2)、高剂量组(S3),每组18只。灌胃给予不同药物,替硝唑首日剂量为20mg/100g,后面按10mg/100g给药;维生素C组剂量为10mg/100g;茄尼醇组剂量分别为1.5mg/100g、3mg/100g、6mg/100g, N组、P组灌胃等体积溶剂,1次／天,分别在灌胃的2、4、6周,每组随机抽取6只大鼠行腹主动脉采血后处死,并分离大鼠上颌骨,左侧用于测量牙槽骨丧失,右侧行组织学HE染色和TRAP染色。ELISA检测血浆中白介素1-β(interleukins1-β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、前列腺素E2 (Prostaglandin E2, PGE2)表达水平以及用羟胺法和DTNB法检测SOD、GSH-Px的活性,TBA法检测MDA含量。2.体外细胞实验：脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬细胞RAW264.7,构建细胞炎症模型。通过MTS法检测化合物茄尼醇对RAW264.7细胞的毒性后,利用构建的细胞炎症反应模型,对茄尼醇进行抗炎和抗氧化作用的研究。实验分为阴性对照组,LPS组,LPS+VitC组,LPS+VitE组,LPS+不同浓度茄尼醇组(3.75uM、7.5uM、15uM、30uM、60uM)。细胞培养液被收集后ELISA检测各组炎症因子TNF-α、IL-1β、PGE2表达水平；收集细胞,羟胺法和DTNB法检测SOD、GSH-Px的活性,TBA法检测MDA含量。以上实验数据采用SPSS17.0数据统计软件包对实验结果进行统计学分析。[结果]1.建模4周后大鼠牙周组织中大量炎性细胞浸润,上皮钉突伸长,牙槽骨不规则吸收,深牙周袋形成,表明牙周炎模型建立成功。在药物分别干预2W、4W、6W后,茄尼醇组牙槽骨丧失程度和破骨细胞活跃程度有减轻趋势,与牙周炎组相比,差异无统计学意义(P0.05)。炎症因子和氧化应激指标在大鼠血浆中的变化：与正常组相比,牙周炎组IL-1β、TNF-α、PGE2的表达均明显增加(P0.05),给药后,牙周炎大鼠血浆中IL-1β、 TNF-α、PGE2的表达水平均显著降低(P0.05),同时SOD、GSH-Px活性升高, MDA的含量降低(P0.05)。2.1mg/mlLPS作用RAW264.7细胞24h后,炎性因子IL-1β、TNF-α、PGE2的表达和MDA的含量均显著增加,SOD和GSH-Px的活性降低。茄尼醇各浓度组均明显降低TNF-α、IL-1β、PGE2的表达,呈浓度依赖性,同时增加了抗氧化酶SOD和GSH-Px的活性,降低了MDA的含量。[结论]应用茄尼醇可以显著降低炎症因子TNF-α、IL-1β、PGE2的表达水平,还可以不同程度的提高SOD、GSH-Px抗氧化酶的活性,降低MDA的含量,但对减轻牙槽骨丧失和抑制破骨细胞的活化作用不明显。
【关键词】：茄尼醇 牙周炎 自由基 炎症因子 抗氧化酶
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781.4
【目录】：

• 英文缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-17
• 实验一 茄尼醇对大鼠实验性牙周炎炎症及自由基水平的影响17-55
• 实验材料与方法17-29
• 结果29-48
• 讨论48-54
• 结论54-55
• 实验二 茄尼醇对LPS诱导的RAW264.7细胞的作用研究55-80
• 实验材料与方法55-65
• 结果65-76
• 讨论76-79
• 结论79-80
• 全文总结80-81
• 问题及展望81-82
• 参考文献82-89
• 综述89-102
• 参考文献96-102
• 攻读学位期间获得的学术成果102-103
• 致谢103

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4 陈s，

本文编号：935212