牙龈卟啉单胞菌合成环二腺苷酸的高效液相色谱-串联质谱法定性分析

发布时间：2017-09-29 21:19

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【摘要】：目的定性检测牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)是否能产生细菌信号分子环二腺苷酸(c-di-AMP),为探索其在P.gingivalis生命代谢以及牙周炎免疫中的作用奠定基础。方法以P.gingivalis标准菌株ATCC33277为实验菌株,抽提细菌内核酸物质作为样品,配置c-di-AMP标准品,通过高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)和高效液相色谱法(HPLC)对样品进行验证。结果 HPLC-MS/MS检出限按照信噪比(S/N)3∶1计算,c-di-AMP标准品出峰的保留时间为7.49 min,P.gingivalis提取物样品在保留时间为8.82 min时有目标峰出现(大于3 S/N)。HPLC检测结果表明,P.gingivalis核酸提取物样品及c-di-AMP标准品均在15.7 min处出现目标峰,且二者的紫外吸收光谱相同。结论牙龈卟啉单胞菌核酸提取物中含有c-di-AMP,牙龈卟啉单胞菌可以合成产生c-di-AMP。
【作者单位】： 南方医科大学南方医院口腔科;南方医科大学公共卫生与热带医学学院卫生监测中心;汕头大学医学院第二附属医院口腔科;
【关键词】： 环二腺苷酸 牙龈卟啉单胞菌 高效液相色谱-串联质谱法
【基金】：国家自然科学基金(81500870) 南方医科大学南方医院院长基金(2013Z006;2012C005)~~
【分类号】：R780.2
【正文快照】： sine monophosphate,c-di-GMP]和环二腺苷酸[bis-(3’-5’)-cyclic dimeric adenosine monophosphate,c-di-AMP]是近年来新发现的,在细菌和古细菌中广泛存在的信号分子[1-2]。目前的研究结果显示,c-di-GMP作为第二信使,在细菌的蠕动、毒力因子的表达、生物膜的形成、细胞周期

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