ID1在涎腺腺样囊性癌发生发展中的作用及功能

发布时间：2017-09-30 01:00

  本文关键词：ID1在涎腺腺样囊性癌发生发展中的作用及功能

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【摘要】：腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)是口腔颌面部常见的唾液腺恶性肿瘤之一,它浸润性极强,术后易复发,是头颈部最具破坏性和不可预见性的肿瘤[1]。因而寻找有效的治疗靶标对于改善涎腺腺样囊性癌的治疗及预后至关重要。DNA结合抑制因子1(inhibitor of DNA binding 1,ID1),该基因可编码螺旋-环-螺旋蛋白(HLH),HLH蛋白可抑制DNA结合及转录激活能力,在细胞生长、衰老和分化等生物学过程中发挥重要作用。研究表明,在多种肿瘤中都有发现ID1基因的异常表达,ID1发挥着类似于癌基因的作用,参与了肿瘤的生长、分化、侵袭及转移。本课题通过基因测序和生物学信息分析发现涎腺腺样囊性癌的差异表达基因ID1,进而研究ID1在涎腺腺样囊性癌发生发展中的作用及功能。研究分为两个部分,分述如下:一、涎腺腺样囊性癌差异表达基因筛选及其临床意义目的:筛选涎腺腺样囊性癌中差异表达基因并分析其临床意义。方法:对涎腺腺样囊性癌高、低转移细胞(SACC-M、SACC-2)提取细胞总RNA,送至苏州众信生物有限公司采用第二代基因测序技术进行RNA测序,对测序结果进行生物学信息分析,筛选SACC细胞的差异表达基因。采用实时荧光定量PCR检测ID1在SACC细胞中的表达量,验证测序结果。通过收集68例涎腺腺样囊性癌组织和50例对应的癌旁正常组织标本,采用免疫组化染色实验研究ID1在涎腺腺样囊性癌临床样本中的表达情况。结果:基因测序结果显示ID1在SACC-M细胞中的表达明显高于SACC-2。GO富集分析显示SACC-M相对SACC-2表达上调的基因大部分都是和细胞移动黏附能力相关的基因,包括基因ID1。实时荧光定量PCR结果显示ID1在SACC-M中的表达明显高于SACC-2。免疫组化染色实验结果显示ID1在涎腺腺样囊性癌组织样本中的表达明显高于癌旁正常组织的样本。结论:ID1在涎腺腺样囊性癌中特异性高表达,且与涎腺腺样囊性癌的高转移有关。二、ID1对涎腺腺样囊性癌细胞生物学行为的影响目的:研究ID1对涎腺腺样囊性癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响。方法:Real-time PCR检测si RNA转染SACC-M细胞后ID1的表达情况。采用CCK-8法、平板克隆形成实验研究ID1表达被抑制后SACC-M细胞增殖能力的变化。分别使用Transwell细胞迁移及侵袭实验研究ID1表达下调后SACC-M细胞迁移及侵袭能力的变化。结果:Real-time PCR结果显示si RNA干扰后ID1在SACC-M中的表达量下降。CCK-8实验结果表明si RNA干扰组SACC-M细胞增殖能力明显弱于阴性对照组。平板克隆形成实验结果显示si RNA干扰ID1的表达后,SACC-M细胞增殖能力随之下降。Transwell细胞迁移及侵袭实验研究结果表明,ID1表达下调后,SACC-M细胞的迁移、侵袭能力也随之下降。结论:ID1对涎腺腺样囊性癌细胞(SACC-M)的增殖、侵袭及迁移起促进作用。
【关键词】：涎腺腺样囊性癌 ID1 实时荧光定量PCR si RNA
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.8
【目录】：

• 附录4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 第一部分 涎腺腺样囊性癌差异表达基因筛选及其临床意义11-30
• 材料与方法11-17
• 结果17-24
• 讨论24-30
• 第二部分 ID1对涎腺腺样囊性癌细胞生物学行为的影响30-41
• 材料与方法30-33
• 结果33-37
• 讨论37-41
• 结论41-42
• 参考文献42-46
• 综述46-58
• 参考文献55-58
• 致谢58

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：945199