4种提取口腔产黑色素细菌DNA方法的比较

发布时间：2017-09-30 01:18

  本文关键词：4种提取口腔产黑色素细菌DNA方法的比较

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【摘要】：目的比较4种提取口腔产黑色素细菌中间普氏菌DNA的方法,即酚-氯仿法、溴化十六烷基三甲铵(CTAB)提取法、Chelex-100提取法及试剂盒。方法分别记录OD260、OD230、OD280及OD340值;聚合酶链反应(PCR)电泳,检测提取DNA的浓度、纯度及对PCR反映体系的影响。结果试剂盒及CTAB法去除黑色素比较差异无统计学意义(P0.05),两者与酚-氯仿及Chelex-100法比较差异有统计学意义(P0.05);CTAB法提取DNA的浓度及纯度的效果要优于试剂盒,差异有统计学意义(P0.05),PCR电泳条带清晰,无拖带。结论 CTAB法可有效去除黑色素及其他杂质,同时获得较高浓度的DNA样品;黑色素并不溶于氯仿/异戊醇混合液,对PCR反应体系有很大影响。
【作者单位】： 天津市南开医院口腔科;天津中医药大学第二附属医院口腔科;
【关键词】： DNA提取 黑色素 聚合酶链反应 电泳 OD值
【分类号】：R781
【正文快照】： 口腔致病菌总量较少,取得的微量样本常需聚合酶连反应(PCR)扩增后再行后续实验,提取样品中的各类杂质对电泳及PCR有较大的影响[1]。以往对提取方法的评价主要集中在多糖、蛋白质及盐类等杂质的去除上,很少有研究评价去除菌体内部的黑色素,而黑色素对PCR及电泳结果也会产生很大

【参考文献】

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1 王q，

本文编号：945319