缺氧条件下口腔黏膜上皮间质化机制研究

发布时间：2017-10-04 07:42

  本文关键词：缺氧条件下口腔黏膜上皮间质化机制研究

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【摘要】：目的通过低压氧舱法模拟海拔7000m Wistar雌性大鼠低压缺氧损伤模型,以探究低压缺氧损伤通过乏氧调节的HIF依赖途径的mi R-92a对上皮组织上皮间质化进程的影响,达到是否可以通过阻断上皮间质化进程,降低上皮源性恶性肿瘤细胞浸润转移、纤维化疾病发生发展的目的。方法1采用低压氧舱法模拟大鼠低压缺氧损伤模型,通过中性蛋白酶DispaseⅡ冷消化法分离口腔黏膜上皮组织。2利用实时荧光定量PCR(q PCR)法检测不同低压缺氧损伤时间处理后的口腔黏膜上皮组织中乏氧调节的mi R-92a的表达差异。3利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测不同低压缺氧损伤时间处理后的口腔黏膜上皮组织中上皮间质化标志性基因E-cadherin、Vimentin和HIF-1α的表达水平。4利用Western Blot法检测不同低压缺氧损伤时间处理后口腔黏膜上皮组织中上皮间质化标志性蛋白E-cadherin、Vimentin和HIF-1α蛋白表达水平。5利用HE染色法观察不同低压缺氧损伤时间处理后的口腔黏膜上皮组织的形态学变化。结果1 DispaseⅡ冷消化分离口腔黏膜上皮组织,基底层细胞完整。2 q PCR实验结果:低压缺氧损伤处理后,低压缺氧损伤12h、24h组与空白对照组相比,mi R-92a表达降低,差别有统计学意义(P0.05)。3 RT-PCR实验结果:低压缺氧损伤处理后,低压缺氧损伤12h、24h组与空白对照组相比,基因HIF-1α、Vimentin表达升高,基因E-cadherin表达降低,差别有统计学意义(P0.05)。4 Western Blot实验结果:低压缺氧损伤处理后,低压缺氧损伤12h、24h组与空白对照组相比,蛋白HIF-1α、Vimentin表达升高,蛋白E-cadherin表达降低,差别有统计学意义(P0.05)。5 HE染色结果:低压缺氧损伤处理后,口腔黏膜上皮组织细胞形态未见明显异常,基底层和棘层细胞未见有丝分裂象。结论低压缺氧损伤上调HIF-1α表达,进而下调miR-92a表达,促进上皮间质化进程,为降低上皮源性恶性肿瘤的浸润转移及纤维化疾病的发生发展提供新思路。
【关键词】：缺氧 口腔黏膜上皮 HIF-1α miR-92a EMT E-cadherin Vimentin
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R781
【目录】：

• 摘要4-5
• Abstract5-9
• 引言9-11
• 第1章 缺氧条件下口腔黏膜上皮间质化机制研究11-50
• 1.1 材料与方法11-28
• 1.1.1 实验材料11-15
• 1.1.2 实验方法15-28
• 1.1.3 统计学分析28
• 1.2 结果28-35
• 1.2.1 Wistar大鼠行为变化28-29
• 1.2.2 Dispase Ⅱ冷消化分离口腔黏膜上皮组织29
• 1.2.3 缺氧后口腔黏膜上皮组织基因miR-92a表达下调29-31
• 1.2.4 缺氧后口腔黏膜上皮组织中基因HIF-1α及上皮间质化标志性基因表达变化31-33
• 1.2.5 低压缺氧损伤后口腔黏膜上皮组织中HIF-1α及上皮间质化标志性蛋白表达变化33-34
• 1.2.6 HE组织切片染色34-35
• 1.3 讨论35-43
• 1.3.1 缺氧模型的选择与制作35-36
• 1.3.2 miRNAs对上皮间质化的调控36-38
• 1.3.3 miR-92a的研究38-40
• 1.3.4 低氧诱导因子与miR-92a及上皮间质化的调控40-43
• 1.4 结论43
• 参考文献43-50
• 第2章 综述50-59
• 2.1 E-cadherin分子结构与生物学特性50
• 2.2 E-cadherin与肿瘤侵袭转移的早期研究50-51
• 2.3 E-cadherin与肿瘤侵袭转移的研究51-54
• 2.3.1 E-cadherin在非小细胞肺癌中的研究51
• 2.3.2 E-cadherin在胃癌中的研究51
• 2.3.3 E-cadherin在肝癌中的研究51-52
• 2.3.4 E-cadherin在食管癌中的研究52
• 2.3.5 E-cadherin在卵巢癌中的研究52-53
• 2.3.6 E-cadherin在乳腺癌中的研究53-54
• 2.4 小结54
• 2.5 展望54
• 参考文献54-59
• 结论59-60
• 致谢60-61
• 导师简介61-62
• 作者简介62-63
• 学位论文数据集63

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本文编号：969448