重庆市及三峡库区大肠杆菌O157的流行病学调查

发布时间：2019-01-18 12:55

【摘要】：肠出血性大肠杆菌(EHEC)是世界上食源性疾病的重要诱因。人类感染EHEC具有潜在的重大威胁并可能引起一系列的并发症，包括腹泻、出血性肠炎(HC)、溶血性尿毒综合征(HUS)等。EHEC的血清型很多，O157∶H7是与人类疾病相关的最常见的血清型。该菌已经在世界上引起多次爆发。我国江苏、安徽两省曾于1999和2000年发生大肠杆菌O157∶H7感染性腹泻爆发流行，并且范围扩大东北、华北及华东地区。由该菌引起的疾病已成为21世纪严重威胁人类生命和健康的传染病，因此对该菌进行流行病学调查，查明该菌的传染源、传播途径和传播范围，为该病的预防和治疗提供科学依据具有重要的意义。 1．大肠杆菌O157的分离鉴定与表型特征分析 目的 了解重庆市及三峡库区大肠杆菌O157的家畜带菌情况及其生化特性和对抗菌药物的敏感性。方法 采集重庆市六个区县家畜粪便和污水样品1504份，接种mEC+n增菌肉汤，37℃振摇孵育6h，取增菌液接种CT-SMAC平板，37℃培养18h，挑取可疑菌落，，经血清学检验、PCR扩增和微量生化实验确认，最后用药敏试纸测试其对常用抗生素的敏感性。结果 在1504份样品中共检出11株O157，其中O157∶H7 7株，O157∶H? 4株；对分离菌株做药物敏感性试验，发现它们对青霉素、氨苄西林、杆菌肽、头孢呋肟、红霉素、庆大霉素、四环素等存在不同程度的耐药。结论 本次调查是首次对重庆市及三峡库区大肠杆菌O157的家畜带菌情况进行较全面的调查，查明了该菌的传染源，对菌株的表型特征进行了研究。 2．大肠杆菌O157毒力与黏附相关基因的检测 目的 了解分离菌株携带毒力及黏附相关基因的情况。方法 用聚合酶链式反应扩增stx1、stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因。结果 所有O157∶H7菌株扩增出eaeA、ehxa、EspA和Tccp基因，但没有扩增出stx1和stx2基因；4株O157∶H?菌株，均没有扩增出stx2、eaeA、ehxA、EspA和Tccp基因，且只有BYY119扩增出stx1基因。结论 由于所有菌株缺失stx2基因，重庆市及三峡库区大肠杆菌O157致病力相对较低。 3．肠出血性大肠杆菌O157∶H7的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析 目的 从基因水平了解分离菌株的多态性。方法 选用限制性内切酶Hinc Ⅱ和EcoR Ⅱ对分离的O157∶H7菌株eaeA基因进行酶切，选用限制性内切酶HaeⅢ、Hinf Ⅰ、EcoR Ⅱ和Rsa Ⅰ对分离的O157∶H7菌株ehxA基因进行酶切，最后对这两个基因进行PCR-RFLP分析。结果 所有分离菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小与标准菌株的eaeA基因和ehxA基因选用限制性内切酶酶切之后所得酶切片段数目和大小相同。结论 重庆市及三峡库区大肠杆菌O157∶H7在基因水平较为保守，多态性较为单一。 4．产志贺毒素大肠杆菌(STEC)stx2a和stx2b血清抗体的检测 目的 了解重庆市及三峡库区STEC携带stx2基因的情况。方法 在两个屠宰场采集商品
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【学位授予单位】：西南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R181.3

【引证文献】

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1 赵明礼;牛源性致病性大肠杆菌的分离鉴定及E.coli O157:H7生物学特性研究[D];东北农业大学;2013年

本文编号：2410739