不同浓度叠氮溴化丙啶和照射协同灭活大肠杆菌8099 DNA效果评价

发布时间：2017-09-20 04:43

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【摘要】：目的评价不同浓度叠氮溴化丙啶(PMA)在不同照射时间对大肠杆菌DNA灭活的效果,确定在实际使用中的最佳浓度和照射时间。方法选择相当于107cfu大肠杆菌(8099)的DNA作为灭活对象,加入终浓度为50μmol/ml、100μmol/ml、150μmol/ml和200μmol/ml的PMA,使用波长为460 nm的LED灯,分别照射5 min、10 min和15 min,然后进行Real Time PCR扩增。结果当PMA的浓度达到150μmol/ml,照射5 min时,大肠杆菌Real Time PCR扩增结果为阴性。结论在实际使用中,要完全灭活107cfu的大肠杆菌(8099)的DNA,需要≥150μmol/ml的PMA,照射时间≥5 min较合适。
【作者单位】： 北京市疾病预防控制中心;
【关键词】： 叠氮溴化丙啶 浓度 照射时间 大肠杆菌
【基金】：北京市自然科学基金(7144201)
【分类号】：R187
【正文快照】： 叠氮溴化丙啶(PMA)能够结合结构不完整的(细胞壁和细胞膜破坏的)细胞内DNA或者游离在细胞外的DNA,通过一定波长的光照,叠氮基团生成高反应性的氮烯,与双链DNA的碳氢化合物部分地结合生成稳定牢固的共价氮碳键,从而形成稳定的DNA修饰,抑制聚合酶连锁反应(PCR)。这为其在消毒学

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本文编号：886009