米诺环素抑制大鼠脊髓背角胶状质神经元超极化激活电流的作用研究

发布时间：2017-10-12 07:15

  本文关键词：米诺环素抑制大鼠脊髓背角胶状质神经元超极化激活电流的作用研究

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【摘要】：目的:慢性疼痛发病率高,是严重影响患者身心健康的公共卫生问题,其发病机制不清,临床防治任重道远。二代半合成四环素类抗菌药物米诺环素具有良好镇痛作用,但该作用的细胞学机制仍不明确。为此,我们利用全细胞膜片钳技术,观察米诺环素对大鼠脊髓背角胶状质(substantia gelatinosa,SG)神经元超极化激活电流(hyperpolarization-activated current,Ih)的影响,以进一步阐明米诺环素镇痛的脊髓机制。方法:选取3-5周龄雄性SD大鼠,行乌拉坦腹腔麻醉及心脏灌流后,以腰骶膨大为中心分离出腰1-骶3段脊髓,剥离硬脊膜、软脊膜及附着神经根。用振动切片机切取厚300微米(μm)的脊髓横切片,利用全细胞膜片钳技术记录不同浓度米诺环素(1-300μM)灌流前后SG神经元Ih振幅、电流密度、激活动力学及反转电位等变化情况。结果:1.约50%SG神经元可记录到Ih,该电流可被ZD7288和Cs Cl阻断;2.大鼠SG不同形态神经元均不同比例地表达Ih;3.米诺环素对SG神经元Ih具有可逆性抑制作用;4.米诺环素对SG神经元Ih的抑制作用呈剂量依赖性,IC50为34μM;5.米诺环素使SG神经元Ih激活曲线向负电位方向移动;6.米诺环素对SG神经元Ih反转电位无明显影响。结论:米诺环素可作用于SG区超极化激活环核苷酸门控阳离子通道,迅速降低SG神经元Ih幅值、减小Ih电流密度,影响Ih激活动力学特性;提示米诺环素抑制Ih可能是其参与疼痛调控的机制之一。
【关键词】：米诺环素 超极化激活电流 脊髓背角胶状质神经元 膜片钳
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R614
【目录】：

• 摘要3-4
• abstract4-8
• 中英文缩略词表8-9
• 第1章 引言9-15
• 1.1 慢性疼痛9-12
• 1.1.1 慢性疼痛的机制9-11
• 1.1.2 慢性疼痛治疗现状11-12
• 1.2 米诺环素12
• 1.3 脊髓背角胶状质神经元12-13
• 1.4 超极化激活电流13-15
• 第2章 材料与方法15-25
• 2.1 实验材料15-17
• 2.1.1 实验动物15
• 2.1.2 实验仪器15-16
• 2.1.3 主要药物及试剂16-17
• 2.2 实验溶液配制17-19
• 2.2.1 蔗糖解剖液17-18
• 2.2.2 人工脑脊液18
• 2.2.3 电极内液18-19
• 2.2.4 常用试剂配制19
• 2.3 脊髓薄片制备19-20
• 2.4 电极制备20-21
• 2.5 电生理记录21-23
• 2.5.1 记录前准备21
• 2.5.2 目标神经元全细胞膜片钳记录21-22
• 2.5.3 Ih记录22
• 2.5.4 Ih激活动力学特性记录22-23
• 2.5.5 Ih电流-电压曲线及反转电位测定23
• 2.5.6 Ih激活时间常数测定23
• 2.5.7 SG神经元形态学实验23
• 2.6 统计学分析23-25
• 第3章 结果25-33
• 3.1 大鼠脊髓背角SG神经元Ih的电生理学特点25-27
• 3.2 大鼠SG神经元形态分类及各类神经元Ih特性27
• 3.3 米诺环素对大鼠SG神经元Ih具有可逆性抑制作用27-29
• 3.4 米诺环素对大鼠SG神经元Ih的抑制作用呈剂量依赖性29-30
• 3.5 米诺环素使大鼠SG神经元Ih激活曲线左移30-31
• 3.6 米诺环素对SG神经元Ih反转电位无明显影响31-33
• 第4章 讨论33-36
• 4.1 大鼠SG神经元Ih特点33-34
• 4.2 米诺环素镇痛机制研究现状34
• 4.3 米诺环素对SG神经元Ih的影响34-35
• 4.4 研究局限之处及还需解决的问题35
• 4.5 小结35-36
• 第5章 结论与展望36-37
• 5.1 结论36
• 5.2 进一步工作的方向36-37
• 致谢37-38
• 参考文献38-43
• 攻读学位期间的研究成果43-44
• 综述44-54
• 参考文献51-54
• 附录54

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：1017359