黄芪多糖对2型糖尿病大鼠胰岛内质网应激及Bcl-2和Bax表达影响的研究
发布时间:2017-12-05 05:17
本文关键词:黄芪多糖对2型糖尿病大鼠胰岛内质网应激及Bcl-2和Bax表达影响的研究
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【摘要】:目的:观察研究中药成分黄芪多糖对2型糖尿病大鼠胰岛内质网应激的影响及凋亡相关基因和蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。材料与方法:1.选择80只体重在220g±50g的SD雄性大鼠,电脑随机数字法选15只作为空白对照组,普通饲料喂养;其余65只大鼠用自配的高糖高脂饲料喂养4周,然后进行造模,造模后筛选出符合糖尿病标准的模型大鼠37只。将糖尿病大鼠随机分为3个组(黄芪多糖组13只、二甲双胍组13只、模型组11只)。空白组及模型组:生理盐水10ml/kg灌胃,每天一次;黄芪多糖组:以400mg/kg黄芪多糖灌胃,每天一次;二甲双胍组:以100mg/kg盐酸二甲双胍灌胃,每天一次,分组干预治疗4周。2.观察大鼠治疗前后的一般情况,包括大鼠的体重、行为、毛色等,分组干预4周后,禁食14小时后,血糖仪测大鼠尾端静脉血糖,称大鼠体重并记录下,以10%水合氯醛(0.35m L/100g)腹腔注射麻醉,然后分离下腔静脉取血,将采集到的血液进行离心,分离出血清,将血清标本保存于-20℃冰箱内待测大鼠的空腹血清胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(GHb)。将胰腺组织无菌操作取出后保存于液氮中,用RT-PCR和Western blot法测定胰岛中的Bcl-2、Bax、CHOP基因和蛋白的表达情况;HE染色法观察胰岛的形态。3.用“X±s”表示计量资料,独立样本t检验用于两组比较,配对资料t检验用于组间比较,计数资料采用卡方检验,多组独立样本检验采用方差分析,P0.05及P0.01表示差异有统计学意义。所有资料均采用SPSS17.0统计软件进行分析。结果:1.实验数据显示,模型组、二甲双胍治疗组和黄芪多糖治疗组大鼠的体重均较空白组降低(P0.01);经过治疗后,二甲双胍组和黄芪多糖组大鼠体重较模型组增高(P0.01)。2.高脂饲料喂养4周后,联合腹腔注射低剂量的STZ诱导后筛选合格的T2DM模型大鼠,与空白组相比,模型组和治疗组的FPG、FINS均显著升高(P0.05),提示糖尿病造模成功。经过4周药物治疗后,黄芪多糖组、二甲双胍组的FPG、FINS和模型组相较均显著降低(P0.05);二甲双胍组FPG、FINS水平低于黄芪多糖组(P0.05)。3.糖化血红蛋白水平:模型组、黄芪多糖组及二甲双胍组均显著高于对照组(P0.01);黄芪多糖组与二甲双胍组均明显低于模型组(P0.01),二甲双胍组水平明显低于黄芪多糖组(P0.01)。4.凋亡相关基因和蛋白Bcl-2及Bax的表达:模型组较对照组Bcl-2表达减弱,Bax表达增强,有显著性差异(P0.01);二甲双胍组和黄芪多糖组较模型组Bcl-2表达均增加,Bax表达均减少,有显著性差异(P0.01),二甲双胍组与黄芪多糖组比较,Bcl-2和Bax表达差异无统计学意义(P0.05)。5.CHOP蛋白和基因表达水平:模型组较空白组CHOP明显上调(P0.01);黄芪多糖组和二甲双胍组较模型组CHOP均明显下调(P0.01);而黄芪多糖组和二甲双胍组无明显差异(P0.05)。6.胰岛形态学观察:光镜下可以观察到模型组大鼠胰岛出现萎缩,轮廓不够饱满,边缘不规则,分布稀疏而不均匀,胰岛内可见空泡;黄芪多糖组与二甲双胍组大鼠胰岛分布比较致密,且二甲双胍组又好于黄芪多糖组。结论:黄芪多糖可以明显降低糖尿病大鼠空腹血糖、血清胰岛素及糖化血红蛋白水平,下调CHOP表达,增加Bcl-2基因和蛋白表达,减少Bax基因和蛋白表达,降低内质网应激水平,改善胰岛的功能形态,从而可以抑制或延缓胰岛内细胞的凋亡以保护胰岛的功能。
【学位授予单位】:安徽中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R285.5
【引证文献】
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 范岩峰;许榕仙;;SD大鼠Ⅱ型糖尿病模型的建立[A];中国营养学会论文汇编之二[C];2007年
2 杨叔禹;李学军;;中医药治疗糖尿病的研究现状及展望[A];第七次全国中医糖尿病学术大会论文汇编[C];2003年
,本文编号:1253693
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