不同时间和浓度的常压氧对大鼠脑缺血半暗带细胞凋亡的影响

发布时间：2017-12-10 21:20

  本文关键词：不同时间和浓度的常压氧对大鼠脑缺血半暗带细胞凋亡的影响

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【摘要】：目的研究不同时间和浓度的常压氧(Normobaric oxygen,NBO)对急性脑缺血再灌注后早期大鼠脑缺血半暗带细胞凋亡的影响,以期为临床急性缺血性脑卒中患者有效吸氧提供有价值依据。方法分组:用随机数字表将150只健康雄性SPF级SD大鼠随机分为5组(假手术组,高、中、低浓度NBO治疗组,空气组),每组再随机分为缺血再灌注后3h、6h、12h、24h、48h、72h六个亚组(n=5)。造模:大鼠用10%水合氯醛0.35ml/100g腹腔注射麻醉。参照Zea Longa线栓法栓塞鼠脑中动脉,栓子插入的深度为20mm-25mm,栓塞2h后观察大鼠行为,以5级4分制标准神经功能缺损评分,剔除0分,随机补充以保证标本数量,评分结束后用乙醚麻醉抽出线栓恢复鼠脑中动脉血流,实现再灌注。干预:将造模成功的大鼠缺血2h后置于自制封闭的氧舱(50cm×30cm×30cm,两个侧面有1cm×1cm的小孔与外界相通:一侧连接氧气和氮气瓶,另一侧与测氧仪相接),以测氧仪监测氧舱内氧浓度,高、中、低浓度NBO治疗的浓度分别为61%、45%、33%;空气组大鼠吸入空气。吸氧前后对大鼠神经功能缺损评分,对应时间点吸氧结束后采集鼠脑组织标本。检测:实时荧光定量PCR检测Caspase-9及Caspase-3 m RNA表达水平;免疫组化法检测大鼠脑组织Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达情况;GENMED超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒检测SOD活性。结果1再灌注后NBO治疗组大鼠的神经功能缺损评分均有不同程度的降低,3h和6h高浓度组,12h和24h高、中浓度组,48h和72h高、中、低浓度组与空气组相比,大鼠神经功能缺损评分差异均具有统计学意义(P0.05)。其它组间差异无统计学意义(P0.05)。2各时间点高、中、低浓度NBO组及空气组的Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2阳性细胞表达与假手术组相比差异均有统计学意义(P0.01)。各时间点高、中、低浓度NBO组的Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2阳性细胞表达与空气组相比差异均具有统计学意义(P0.01)。除72h外其他时间点高浓度NBO组的Caspase-9、Caspase-3、Bax、Bcl-2阳性细胞表达与低浓度NBO组相比差异均具有统计学意义(P0.05)。3各时间点高、中、低浓度NBO组及空气组的SOD活性与假手术组相比差异均有统计学意义(P0.01)。各时间点高、中、低浓度NBO组的SOD活性与空气组相比,均有不同程度的增加,差异均具有高、中、低统计学意义(P0.01)。除72h外,其他时间点高浓度NBO组的SOD活性与低浓度NBO组相比差异均具有统计学意义(P0.05)。结论1不同浓度NBO可以改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能,且高浓度NBO改善较为明显;2不同浓度NBO可明显抑制大鼠急性脑缺血再灌注早期促凋亡因子Caspase-9、Caspase-3和Bax的表达,增加抗凋亡因子Bcl-2的表达;3不同浓度NBO可以适当促进抗氧化酶SOD的表达,减轻氧化应激损伤。4 45%~61%浓度NBO在3h~72h效果较好,为临床急性缺血性脑卒中患者有效吸氧提供了有价值的参考依据。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R473.74

【参考文献】

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1 侯丹;余丹;;局部亚低温治疗对急性大面积脑梗死患者血清PAF的影响[J];天津医药;2013年02期

2 刘盎;隋树杰;张倩;周晓辰;;常压氧疗治疗缺血性脑卒中的实验研究[J];护理研究;2013年13期

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本文编号：1275934