七氟烷预处理对心脏瓣膜置换术患者外周血单个核细胞内Nrf2蛋白和心肌抗氧化应激的影响

发布时间：2018-01-13 22:17

本文关键词：七氟烷预处理对心脏瓣膜置换术患者外周血单个核细胞内Nrf2蛋白和心肌抗氧化应激的影响　出处：《安徽医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：心肺转流术(CPB)可引起机体器官缺血再灌注损伤,七氟烷是一种常用的吸入性麻醉药,具有心肌保护作用,而作用机制仍未完全阐明,氧化应激是产生缺血再灌注损伤的作用机制之一,核因子相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, Nrf2)处于抗氧化应激的关键地位,本文通过检测单个核细胞内Nrf2的表达、血清中心肌损伤指标和观察相关临床指标,评价七氟烷预处理对CPB下行心脏瓣膜置换术患者外周血单个核细胞内Nrf2蛋白表达和心肌抗氧化应激的影响,为探讨七氟烷对心肌保护作用的机制提供一定的参考依据。方法：选取择期CPB下心脏瓣膜置换术患者40例,随机分为2组(n=20)。七氟烷预处理组(S组)：切皮至主动脉阻断前,吸入呼气末浓度为1%七氟烷20min,随后予以10min洗脱期,如此重复2次：对照组(C组)：不给予吸入麻醉药。常规术前准备,患者入室后开放外周静脉,监测五导联心电图(ECG)、心率(HR)、指测脉搏氧饱和度(Sp02)、有创血压、鼻咽直肠温度和Narcotrend麻醉深度指数(Narcotrend Index, NTI)。经外周静脉给予全身麻醉诱导药物,剂量：依托咪酯0.2～0.4 mg/kg、咪达唑仑0.08～0.15 mg/kg、舒芬太尼0.5～0.8 gg/kg、罗库溴铵0.6～1 mg/kg,麻醉诱导维持循环平稳。气管插管后行机械控制通气,呼吸机参数：氧流量2-3L/min,潮气量(VT)6～10 mL/kg,呼吸频率(RR)12～15次/min,吸呼比(I：E)1：1.5～2,维持呼气末二氧化碳分压(1End-tidal carbon dioxide partial pressure, PETCO2)35～ 45 mmHgo经右颈内静脉穿刺留置三腔中心静脉导管,监测中心静脉压(CVP)。经口置入食管超声多普勒探头(WaKie TO,Atys Medical,法国)监测左心功能。采用德国Jostra HL20型体外循环机和Maquet膜式氧合器进行CPB,非搏动性灌注方式,CPB期间维持平均动脉压(MAP)50-80mmHg。术后带管控制呼吸,常规监护下送入心脏外科加强监护病房(ICU),待呼吸循环稳定、符合拔管条件时拔除气管导管。分别于麻醉诱导前(T1)、主动脉开放后2h(T2)、24h(T3)、48h(T4)时点采集两组患者桡动脉血样,采用ELISA试剂盒检测血清中cTnI、丙二醛(MDA)浓度和超氧化物歧化酶(SOD)活性。于T1和T3时点抽取桡动脉血样,立即用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)后提取核蛋白,放入-80℃冰箱,待标本收集后,BCA法测蛋白浓度,按常规Western blot法完成操作(Nrf2抗体购于Bioworld公司,美国),用Image-Pro Plus 6.0软件进行蛋白灰度分析。临床指标：记录切皮前、停CPB后30min和手术结束时HR、MAP、每搏量(stroke volume, SV)和心脏指数(cardiac index, CI);记录主动脉阻断时间、CPB时间、术中失血量、心脏自动复跳率、机械通气时间、ICU停留时间、实际住院天数、血管活性药物使用量和术后一周心脏左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)。结果：两组患者一般资料和术中各指标差异均无统计学意义(P＞0.05)。与麻醉前T1时比较,T2、T3和T4时两组患者血清中cTnI浓度均明显升高(P＜0.05),但各时点S组均明显低于C组,差异具有统计学意义(P＜0.05)。与T1时比较,两组T2～4时血清中MDA浓度升高,SOD活性下降(P＜0.05)：与C组比较,S组T2-4时MDA浓度降低,SOD活性升高(P＜0.05)。与麻醉前比较,两组主动脉开放后24h外周血单个核细胞胞核内Nrf2蛋白表达升高(P＜0.05)；与C组比较,S组主动脉开放后24h胞核内Nrf2蛋白表达升高(P＜0.05)。切皮前两组患者HR、MAP、SV和CI比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；停CPB后30min和手术结束时,S组中MAP、SV和CI均高于C组(P＜0.05),S组HR低于C组,但差异无统计学意义。两组中LVEF值术后均较术前降低,但术后LVEF值S组较C组高(P0.05)。与C组比较,S组中多巴胺用量和多巴酚丁胺用量均减少(P＜0.05)；ICU停留时间、机械通气时间和实际住院天数均缩短(P＜0.05)；心脏自动复跳率和肾上腺素使用例数比较差异均无统计学意义。结论：七氟烷预处理可以减轻心肺转流术下心脏瓣膜置换术患者心肌损伤,减弱体内氧化应激反应,利于患者恢复,其机制可能与增强体内Nrf2蛋白的表达,启动Nrf2-ARE抗氧化信号传导通路有关,这为研究七氟烷的心肌保护机制提供一定的参考价值。
[Abstract]:Objective : To study the effects of cardiac arrest on the expression of Nrf2 protein in peripheral blood mononuclear cells ( Nrf2 ) and myocardial anti - oxidative stress in patients with cardiopulmonary bypass ( CPB ) . The blood samples of radial artery were collected from peripheral blood mononuclear cells ( PBMC ) from 35 to 45 mmHgo through external jugular vein puncture . After tracheal intubation , the blood samples were collected from peripheral blood mononuclear cells ( MAP ) from 35 to 45 mmHgo . The clinical indexes : HR , MAP , stroke volume ( SV ) and cardiac index ( CI ) were recorded before and after CPB , and HR , MAP , stroke volume ( SV ) and cardiac index ( CI ) were recorded before and after CPB . Results : Compared with group C ( P < 0.05 ) , the concentration of MDA in serum of group S was higher than that in group C ( P < 0.05 ) . Compared with group C , the concentration of MDA and SOD in group S were significantly lower than that in group C ( P < 0.05 ) . Compared with group C , there was no significant difference between the two groups ( P < 0.05 ) . Compared with group C , the concentration of MDA in group S was lower than that in group C ( P < 0.05 ) .

【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R614

【参考文献】