龟鹿益神颗粒对慢性疲劳大鼠骨骼肌细胞色素氧化酶及色素含量的影响

发布时间：2018-01-24 01:37

本文关键词： 慢性疲劳综合征龟鹿益神颗粒细胞色素氧化酶细胞色素　出处：《河南中医学院》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：建立大鼠慢性疲劳的动物模型，观察龟鹿益神颗粒对慢性疲劳大鼠的一般情况及行为学指标（旷场实验、力竭游泳时间）的影响，通过测定不同组别大鼠骨骼肌线粒体细胞色素氧化酶（COX）及细胞色素（Cyt a、Cyt b、Cyt c、Cyt c1）含量的变化来观察龟鹿益神颗粒的作用，以期从微观角度研究龟鹿益神颗粒的抗疲劳机制。方法:1.造模、分组：雄性SPF级SD大鼠40只，体重200±20克，适应性饲养一周后随机抽取16只不造模，其余24只大鼠根据改良的曲长江法进行造模，以力竭游泳法、束缚法、夹尾法这一复合方式构建慢性疲劳大鼠模型。在造模结束后，造模大鼠随机分为3组，每组8只，分别为模型组、龟鹿益神组、苁蓉益肾组；未造模大鼠随机分为两组，每组8只，分别为正常组和龟鹿对照组。2.给药方法：正常组、模型组大鼠给予生理盐水灌胃；龟鹿对照组、龟鹿益神组大鼠给予龟鹿益神配方颗粒混悬液灌胃；苁蓉益肾组给予苁蓉益肾颗粒混悬液灌胃。各组大鼠灌胃1次/d，连续14天。3.取材：将大鼠成功麻醉后速取大鼠双侧股四头肌约1g，制成匀浆液，差速离心得线粒体，超声波细胞粉碎仪破坏线粒体膜后低温保存，整个过程均要在4℃或4℃以下进行。4.指标检测：于造模前、造模后、灌胃后分别观察大鼠的体重、行为学指标（包括力竭游泳时间、跨格次数、直立次数）。通过紫外分光光度计，用差光谱法检测不同组别大鼠骨骼肌线粒体细胞色素氧化酶及细胞色素含量，收集数据并用SPSS18.0统计软件进行处理。结果：1.一般情况：a.大鼠进食、粪便、皮毛的改变：造模前，各组大鼠进食饮水、粪便、皮毛色泽等均无明显差异。造模后，各造模组大鼠均出现不同程度的“脾虚”症状：进食饮水减少、体重减少、眯眼、疲怠少动、皮毛枯槁无光、便溏尾脏等；正常组、龟鹿对照组情况如常。灌胃后，龟鹿益神组、苁蓉益肾组大鼠进食量明显增加、毛变光滑、活动增加，龟鹿益神组增加更明显。模型组变化不明显。b.大鼠体重的变化：造模前，各组大鼠体重无明显差别。造模后，模型组、龟鹿益神组、苁蓉益大鼠体重明显低于正常组，有显著性差异（P0.05）。三个造模组间进行比较未见明显差异（P0.05）。灌胃后：模型组大鼠体重明显低于其余4组，差异具有显著性（P0.05）；正常组大鼠体重高于苁蓉益肾组，，且差异有统计学意义（P0.05），而与龟鹿益神组相比，则无显著性差异（P0.05）。 2.行为学情况：造模前，各组大鼠跨格直立次数、力竭游泳时间无显著性差异（P0.05）。造模后，造模各组大鼠跨格直立次数、力竭游泳时间均低于正常组，有显著性差异（P0.05）；各造模组之间比较无明显差异（P0.05）。灌胃后，正常组大鼠跨格直立次数、力竭游泳时间低于龟鹿对照组，有显著性差异（P0.05），而与龟鹿益神组、苁蓉益肾组相比，则无显著性差异（P0.05）。模型组大鼠跨格直立次数、力竭游泳时间显著低于其余4组，有显著性差异（P0.05）。龟鹿益神组高于苁蓉益肾组，有显著性差异（P0.05）。 3.大鼠骨骼肌线粒体细胞色素氧化酶（COX）、细胞色素（Cyta、Cytb、Cytc、Cytc1）含量检测：龟鹿益神组大鼠骨骼肌线粒体COX、Cyt含量和正常组相比，差别不大，无显著性差异（P0.05）。模型组含量均低于其他各组，有显著性差异（P0.05）。龟鹿益神组含量高于苁蓉益肾组，差异有显著性（P0.05）。正常组含量高于苁蓉益肾组，而低于龟鹿对照组，均具有显著性差异（P0.05）。结论：1.本实验采用复合方式构建慢性疲劳大鼠模型，将过度运动导致身体疲劳与心理应激相结合，高度模拟人体慢性疲劳综合征发病的内外环境，确保动物模型建立的合理性与科学性，使本实验结果更准确。 2.龟鹿益神颗粒可以显著提高慢性疲劳大鼠体重、跨格及直立运动次数，明显延长慢性疲劳大鼠的力竭游泳时间，能改善其心理和身体的疲劳状态，效果优于苁蓉益肾颗粒。且能提高正常大鼠的抗疲劳能力，具有“治未病”的潜在功效，为龟鹿益神颗粒的临床应用和推广提供了基础研究资料。 3.龟鹿益神颗粒可显著提高慢性疲劳大鼠骨骼肌线粒体细胞色素氧化酶及细胞色素含量，能明显纠正线粒体代谢障碍状态，并优于苁蓉益肾组。本实验从微观角度证明了龟鹿益神颗粒在治疗慢性疲劳综合征上的科学性和可行性，进而补充了龟鹿益神颗粒的抗疲劳机制。
[Abstract]:Objective : To establish an animal model of chronic fatigue in rats , and observe the effects of Gui - deer Yi - shen Granule on the general situation and behavior index ( open - field experiment and exhaustive swimming time ) of chronic fatigue rats . The effects of the contents of cytochrome oxidase ( COX ) and cytochrome ( Cyt a , Cyt b , Cyt c , Cyt c1 ) in skeletal muscle of different groups of rats were measured . Methods : 1 . The rats were randomly divided into three groups : normal group and model group . The rats were randomly divided into three groups . The contents of cytochrome oxidase and cytochrome oxidase and cytochrome oxidase in skeletal muscle of different groups were measured by ultraviolet spectrophotometer . The data were collected and processed by SPSS 18.0 . Results : 1 . General conditions : a . Changes of eating , feces and fur of rats showed no significant difference in rats fed drinking water , feces , fur and so on before molding . 2 . Behavior study : There was no significant difference ( P0.05 ) . There was no significant difference ( P0.05 ) between the model group and the control group ( P0.05 ) . Compared with the control group , there was a significant difference ( P0.05 ) . 3 . The content of COX , Cyta , Cytb , Cyt and Cytc1 in the skeletal muscle of the rats showed no significant difference ( P0.05 ) . 2 . The Gui - deer Yi - shen granule can obviously improve the body weight , the cross - grid and the vertical movement times of the chronic fatigue rats , obviously prolong the exhaustion swimming time of the chronic fatigue rats , improve the fatigue state of the chronic fatigue rats , improve the fatigue state of the normal rats , and have the potential efficacy of " treating the disease " , and provide basic research data for the clinical application and popularization of the tortoise and deer Yi - shen granules . 3 . In order to improve the content of cytochrome oxidase and cytochrome oxidase and cytochrome oxidase in skeletal muscle of chronic fatigue rats , Gui - deer Yi - shen granule can obviously correct the state of mitochondrial metabolism disturbance , and it is superior to the cistanche - benefiting kidney group . This experiment proves the scientific character and feasibility of Gui - deer Yi - shen granule in the treatment of chronic fatigue syndrome , and then supplements the anti - fatigue mechanism of Gui - deer Yi - shen granule .

【学位授予单位】：河南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R285.5

【参考文献】