被动吸烟对实验性牙周炎大鼠牙周组织的影响及槲皮素的保护作用
发布时间：2018-02-02 13:12
本文关键词： 牙周炎 被动吸烟 TNF-α COX-2 槲皮素 出处：《河北医科大学》2014年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的：通过大鼠牙周结扎、被动吸烟和槲皮素灌喂8周，建立牙周炎和被动吸烟牙周炎及槲皮素干预大鼠模型。对比观察大鼠牙周组织形态学变化，检测大鼠牙周组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧化酶-2(COX-2)含量。探讨被动吸烟对牙周炎大鼠牙周组织的影响，槲皮素对牙周炎及被动吸烟牙周炎大鼠牙周组织的保护作用。 方法：选用60只体重300g左右的6月龄健康雄性Wistar大鼠，随机分为六组:正常对照组（N组），被动吸烟组（P组）,单纯结扎组（L组），被动吸烟结扎组（LP组）,单纯结扎+槲皮素组（LQ组）,被动吸烟结扎+槲皮素组（LPQ组），每组10只。正常组不加干预措施，正常喂养。L组、LQ组、LP组、LPQ组大鼠给予全身麻醉，以直径0.20mm的正畸钢丝结扎双侧上颌第一磨牙牙颈部。LQ组，LPQ组大鼠给予槲皮素50mg／kg灌喂。LPQ组并于灌喂60min后采用密闭空间内熏烟的方法进行被动吸烟的干预，每次60min,每次10只香烟。P组，LP组进行相同的被动吸烟处理。给药和被动吸烟8周后，处死各组大鼠，保留上颌骨，立即放入10㳠甲醛溶液固定48小时，然后经10㳠EDTA溶液脱钙8周，制作牙体牙周组织连续切片。各组切片行HE染色，光镜下观察牙周组织的形态学变化，并采用免疫组织化学染色法检测各组牙周组织中TNF-α、COX-2的水平变化，作统计学分析。 结果：1牙周炎大鼠模型的建立： 单纯结扎组大鼠上颌第一磨牙肉眼观察：结扎8周，牙龈红肿，触及出血，牙周袋形成。牙体牙周组织切片镜下观察：结扎8周，结合上皮向根方增殖，形成浅牙周袋；沟内上皮和结合上皮下结缔组织内可见淋巴细胞等炎细胞浸润；牙龈与牙周膜纤维溶解、排列紊乱；牙槽骨吸收，表面呈蚕食状，可见破骨细胞。说明实验性牙周炎大鼠模型成功建立。2实验性牙周炎大鼠牙周组织病理学观察： 正常组：牙龈乳头形态基本完整，结合上皮位于釉牙骨质界处，，结缔组织内无明显炎细胞浸润，牙周膜纤维排列整齐，牙槽嵴顶无吸收。 被动吸烟组：牙龈乳头结构不良，结合上皮附着于釉牙骨质界处,沟内上皮及结合上皮下有少量炎细胞浸润，牙槽嵴顶形态不规则。 单纯结扎组：牙龈上皮钉突伸长，结合上皮离开釉牙骨质界，向根方增殖，形成牙周袋，结缔组织内见较多的炎症细胞浸润，牙周膜纤维排列紊乱，血管扩张充血，牙槽骨吸收，牙槽嵴顶处可见破骨细胞。 被动吸烟结扎组：牙龈乳头形态破坏，结合上皮向根方增殖，形成较深的牙周袋，有的深达根尖1/3,结缔组织内见较多的淋巴细胞等炎细胞，牙槽骨吸收明显，可见明显的吸收陷窝和破骨细胞。 结扎+槲皮素组：牙龈乳头结构破坏，结合上皮向根方增殖，形成牙周袋，结缔组织内见炎细胞浸润，牙槽骨内见少量破骨细胞，较多成骨细胞，可见新生骨。 被动吸烟结扎+槲皮素组：结合上皮向根方增殖，有牙周袋形成，结缔组织内见炎细胞浸润，牙槽骨内见少量的骨吸收陷窝和破骨细胞，牙槽嵴顶见成骨细胞。3实验大鼠牙周组织中TNF-α、COX-2的表达3.1实验大鼠牙周组织中TNF-α的的表达： TNF-α在牙周组织中主要表达于牙周膜成纤维细胞、破骨细胞及血管内皮细胞中，阳性染色为黄色或棕黄色颗粒。其六组的平均光密度值分别为：正常组：0.129±0.008；被动吸烟组：0.142±0.011；单纯结扎组：0.174±0.012；被动吸烟结扎组：0.289±0.012;结扎+槲皮素组：0.154±0.009；被动吸烟结扎+槲皮素组：0.196±0.003。 平均光密度值测定统计分析结果：3.1.1单纯结扎组、被动吸烟结扎组高于正常组(P0.05)3.1.2被动吸烟组高于正常组(P0.05)，被动吸烟结扎组明显高于单纯结扎组(P0.05)3.1.3结扎+槲皮素组低于单纯结扎组(P0.05)3.1.4被动吸烟结扎+槲皮素组明显低于被动吸烟结扎组(P0.05)3.2实验大鼠牙周组织中COX-2的表达： COX-2在牙周组织中主要位于牙周膜成纤维细胞、骨细胞和成骨细胞中，阳性染色为黄色或棕黄色颗粒。其六组的平均光密度值分别为：正常组：0.120±0.015；被动吸烟组：0.136±0.014；单纯结扎组：0.182±0.008；被动吸烟结扎组:0.298±0.008;结扎+槲皮素组：0.143±0.002；被动吸烟结扎+槲皮素组：0.205±0.006。 平均光密度值测定统计分析结果：3.2.1单纯结扎组、被动吸烟结扎组高于正常组(P0.05)3.2.2被动吸烟组高于正常组(P0.05)，被动吸烟结扎组明显高于单纯结扎组(P0.05)3.2.3结扎+槲皮素组低于单纯结扎组(P0.05)3.2.4被动吸烟结扎+槲皮素组明显低于被动吸烟结扎组(P0.05) 结论： 1正畸钢丝结扎大鼠上颌第一磨牙及吸烟箱给予大鼠被动吸烟成功建立大鼠牙周炎及被动吸烟牙周炎模型。 2被动吸烟组比正常组牙周组织中炎细胞增多，TNF-α、COX-2表达增高，提示被动吸烟引起牙周组织的炎症性改变。 3被动吸烟牙周炎组较牙周炎组大鼠牙周袋深度、炎细胞浸润程度、牙槽骨吸收程度严重，TNF-α、COX-2水平高，提示被动吸烟加重牙周组织的炎症。 4+槲皮素组较单纯牙周炎及被动吸烟牙周炎组牙周组织的炎症程度轻，TNF-α、COX-2的表达水平低，提示槲皮素对牙周组织有保护作用。
[Abstract]:Objective: through rat periodontal ligation, passive smoking and quercetin were fed for 8 weeks, the establishment of periodontitis and passive smoking periodontitis and quercetin rats. Observe rat periodontal tissue morphological changes, tumor necrosis factor alpha detection in rat periodontal tissue (TNF- alpha), cyclooxygenase (COX-2) -2 content. To explore the effects of passive smoking on periodontitis periodontal tissue of rats. The protective effect of quercetin on periodontitis and passive smoking periodontitis periodontal tissue of rats.
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