JNK抑制剂对硫酸鱼精蛋白诱导的大鼠膀胱炎作用研究

发布时间：2018-02-06 07:42

  本文关键词： 间质性膀胱炎 TGFβ MAPK 硫酸鱼精蛋白 乙酰半胱氨酸 大鼠膀胱炎 SP600125　出处：《第三军医大学》2014年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究背景及目的： 间质性膀胱炎（interstitil cystitis，IC）是一种累及膀胱壁全层的慢性炎性疾病，主要临床表现为下尿路症状伴耻骨上区的疼，膀胱容量进行缩小，其病因至今不明。目前国内外对IC逼尿肌病变仍缺乏研究，导致IC肌层的分子生物学甚至是形态学研究几乎是一片空白。TGFβ被认在多种纤维化疾病的发生中起到重要作用，而MAPK通路是参与炎症及纤维化调节的重要信号通路。本实验研究了人类间质性膀胱炎膀胱形态学及TGFβ，MAPK信号通路相关蛋白的表达水平，并探索NAC及JNK通路抑制剂对大鼠膀胱炎模型的治疗作用及可能机制。 方法： 本实验选取了11例间质性膀胱炎膀胱标本及9例膀胱癌癌旁正常组织。形态学采用H.E.染色观察粘膜上皮缺损，膀胱间质炎症浸润；甲苯胺蓝染色观察肥大细胞数量；Masson染色观察膀胱壁胶原纤维沉积。使用免疫组化染色观察TGFβ，Smad2/3，p-Smad2/3，CTGF表达及分布。使用Westernblot检测TGFβ，Smad2/3，p-Smad2/3，CTGF，JNK，p-JNK，c-jun，p-c-jun，ERK1/2，p-ERK1/2，P38，p-P38，IL-6，TNF-α表达量。 采用雌性SD大鼠112只，随机分为正常对照组，生理盐水灌注组，硫酸鱼精蛋白灌注组，硫酸鱼精蛋白灌注+生理盐水注射组，PPCES注射+硫酸鱼精蛋白灌注组，SP600125注射+硫酸鱼精蛋白灌注组，乙酰半胱氨酸注射+硫酸鱼精蛋白灌注组。每组16只大鼠。所有大鼠每周处理三次，持续一个月。模型成功后，每组大鼠随机选取8只行麻醉下膀胱尿动力学检测。记录大鼠膀胱基压，BP,膀胱峰压PP,收缩间歇ICI,膀胱容量BC。取大鼠膀胱行H.E.染色观察粘膜上皮缺损，膀胱间质炎症浸润；甲苯胺蓝染色观察肥大细胞数量。Westernblot检测JNK，p-JNK，c-jun，p-c-jun，IL-6，TNF-α表达量。 结果： 1. H.E.染色，甲苯胺蓝染色，Masson染色显示人间质性膀胱炎膀胱较正常组织，上皮变薄，，肥大细胞浸润明显，逼尿肌肌束间胶原纤维沉积明显。 2.免疫组化染，Westernblot检测提示人间质性膀胱炎膀胱TGFβ，Smad2/3，p-Smad2/3，CTGF， p-JNK，IL-6，TNF-α表达量较正常组织明显升高（P〈0.05）。Westernblot检测提示ERK1/2，p-ERK1/2表达下降（P〈0.05）；P38，p-P38，JNK表达无差异（P〉0.05）。 3.动物实验H.E.染色，甲苯胺蓝染色提示NAC，SP600125能够降低膀胱炎症（P〈0.05），减少肥大细胞浸润（P〈0.05）。尿动力学检测提示NAC，SP600125能改善收缩间歇ICI（P〈0.05）,膀胱容量BC（P〈0.05），但对膀胱基压，BP,膀胱峰压PP改善不明显（P〈0.05）。 4.动物实验Westernblot检测提示NAC能够降低p-c-jun，IL-6，TNF-α（P〈0.05）。提示NAC能够降低JNK通路活性来降低炎症因子释放。 进一步的，SP600125干预组大鼠膀胱p-JNK，p-c-jun，IL-6，TNF-α表达均较对照组降低（P〈0.05），提示SP600125能够降低JNK通路活性来降低炎症因子释放。 结论： 在人类间质性膀胱炎，膀胱纤维化及炎症可能和TGFβ及MAPK通路的激活有关。在硫酸鱼精蛋白诱导的大鼠膀胱炎模型，NAC能缓解膀胱炎症改善尿动力参数，其机制可能是降低JNK通路活性减少IL-6，TNF-α炎症因子表达。而进一步使用JNK通路抑制剂SP600125干预模型大鼠提示降低JNK通路活性能明显减少炎症因子释放，改善膀胱炎症及尿动力学参数。
[Abstract]:Research background and purpose:
Interstitial cystitis (interstitil cystitis IC) is a kind of bladder wall involving chronic inflammatory disease, the main clinical manifestations of lower urinary tract symptoms associated with suprapubic pain, bladder capacity was reduced, its etiology is still unknown. At home and abroad on the IC is still lack of research on these changes, resulting in molecular biology IC muscle and even morphological research is almost a blank.TGF beta is considered to play an important role in the occurrence of a variety of fibrotic diseases, while the MAPK pathway is an important signaling pathway involved in the regulation of inflammation and fibrosis. The experimental study of human interstitial cystitis bladder morphology and TGF beta, the expression level of MAPK signaling pathway protein, and to explore the therapeutic effect of NAC and JNK pathway inhibitor on rat cystitis model and its possible mechanism.
Method锛

本文编号：1493943