丙酸睾酮激活Nrf2-ARE信号通路改善老年大鼠肾脏功能

发布时间：2018-05-19 18:18

本文选题：丙酸睾酮 + 衰老　；参考：《河北医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：在正常衰老过程中,肾脏会出现功能的进行性衰退。组织学上检测发现,老年人和衰老大鼠均出现肾脏局灶节段性肾小球硬化和肾小球数量减少。形态学改变包括与年龄有关的系膜基质扩张,肾小球直径增加,基底膜增厚和毛细血管循环的损失。年龄相关的肾小球疾病的病因是多因素的,包括细胞外基质的合成和降解产物之间的不平衡,以及血流动力学的改变。近年来的研究显示,在各种组织中的老化与氧化应激增加密切相关。核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)能够诱导抗氧化反应元件(Antioxidant response element,ARE)调节基因,被公认为是一种主要的细胞抗氧化应激防御机制。激活Nrf2-ARE途径可能对机体具有保护作用。随着年龄增长,男性体内睾酮水平含量降低。然而,睾酮是否能够通过激活肾脏Nrf2-ARE途径,对衰老的肾脏起到抗氧化应激的保护作用,目前尚不清楚。目的:探讨长期丙酸睾酮(Testosterone propionate,TP)处理对老年大鼠肾功能及肾脏氧化应激状态的影响及Nrf2-ARE抗氧化应激途径参与的机制。方法:成年雄性Wistar大鼠共30只随机分成3组。6月龄组(6Mon,n=10),24月龄组(24Mon,n=10)和24月龄皮下TP处理组(24Mon-TP,n=10)。24Mon-TP组大鼠在大鼠21月龄时皮下注射TP,剂量2mg/kg,每日1次,共计给药12周(84天)。6Mon组和24Mon组大鼠同时只皮下注射芝麻油。每组各5只大鼠灌注固定后取肾脏用于免疫组织化学染色,另外5只大鼠直接断头取肾组织用于氧化应激参数、实时定量PCR和免疫印迹检测,用于免疫组织化学染色的大鼠麻醉后,于右心耳处收集静脉血用于肾功能指标ELISA测定。结果:1肾功能指标检测结果利用ELISA检测发现,与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠血清尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(Creatinine,Cre)、尿酸(Uric acid,UA)和β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2MG)(P0.01)的含量显著增加,长期TP处理后上述指标明显降低(P0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P0.01)。2肾脏氧化应激参数结果通过氧化应激参数检测发现,与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肾脏丙二醛(Malondialdehyde,MDA)和脂质过氧化物(Lipid peroxidation,LPO)水平显著升高(P0.01),还原性谷胱甘肽(Reduced glutathione,GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-px)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)水平显著降低(P0.01),长期TP处理后MDA和LPO水平显著降低(P0.01),GSH、GSH-px、CAT和SOD水平显著增加(P0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P0.01)。3实时定量PCR检测结果实时定量PCR检测结果显示,与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肾脏Nrf2 mRNA、血红素加氧酶-1(Home oxygenase-1,HO-1)mRNA和苯醌氧化还原酶-1(Quinine oxidoreductase-1,NQO1)mRNA的表达显著降低(P0.01),长期TP处理后上述指标表达明显增加(P0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P0.01)。4免疫印迹检测结果免疫印迹检测结果显示,与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肾脏Nrf2、HO-1和NQO1蛋白的表达显著降低(P0.01),长期TP处理后上述蛋白表达明显增加(P0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P0.01)。5免疫细胞化学检测结果免疫细胞化学检测结果显示,与6月龄大鼠相比,老年24月龄大鼠肾脏NQO1的表达显著降低(P0.01),长期TP处理后NQO1的表达明显增加(P0.01),但未达到6月龄组大鼠水平(P0.01)。结论:长期TP处理能够激活衰老肾脏的Nrf2-ARE抗氧化应激途径,改善衰老肾脏的氧化应激状态,从而改善老年大鼠肾功能。实验结果为老年应用TP辅助治疗衰老过程中出现的肾功能损伤提供实验依据。
[Abstract]:The effects of long - term testosterone ( TP ) treatment on renal function and oxidative stress in aged rats were studied . Compared with 6 - month - old rats , the levels of MDA and LPO in aged 24 - month - old rats were significantly lower than those in 6 - month - old rats ( P0.01 ) , but the levels of GSH , GSH - px , CAT and SOD in aged 24 - month - old rats were significantly decreased ( P0.01 ) . The expression of HO - 1 and NQO1 protein decreased significantly ( P0.01 ) , but the expression of NQO1 increased significantly after long - term TP treatment ( P0.01 ) .
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R692

【参考文献】