高血压大鼠大小动脉血管重构的差异比较

发布时间：2019-08-15 18:15

【摘要】：目的:探讨自发性高血压大鼠(SHR)大、小动脉血管重构的差异。方法:以20周龄雄性SHR为实验组,同龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为对照组。每周测量体重和血压,43周龄大鼠麻醉取血,留取胸主动脉和肠系膜小动脉组织。HE染色观察比较大、小动脉形态学变化,天狼星红-维多利亚蓝染色检测胶原纤维和弹力纤维变化,激光扫描共聚焦显微镜和Western blot分析Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,透射电子显微镜观察动脉超微结构变化,原位末端标记法(TUNEL)和增殖细胞核抗原(PCNA)检测评估血管壁细胞凋亡与增殖情况。结果:小动脉血管内径(ID)和血管腔横截面积(LCSA)减小,壁厚内径比(WT/ID)和壁腔横截面积比(WCSA/LCSA)增大,外膜成纤维细胞增殖并部分迁移,胶原增多,以III型胶原增多为主,血管壁细胞的增殖指数和凋亡指数增加;主动脉ID、LCSA、WT/ID和WCSA/LCSA均增大,中层血管平滑肌细胞(VSMCs)肥大增生明显,胶原增多,血管壁细胞的增殖指数和凋亡指数增加。结论:高血压大鼠大、小动脉血管重构差异明显,小动脉以基质增多,特别是外膜III型胶原蛋白增多为主,血管壁细胞凋亡增加;大动脉以血管壁细胞增生,特别是VSMCs增生、肥大为主。
【图文】：

个视野中的PCNA阳性细胞或凋亡细胞总数/总细胞数×100%。4统计学处理所有统计分析均应用SPSS13．0软件处理，计量资料以均数±标准差(mean±SD)表示，两组间均数比较采用非配对t检验，以P＜0．05为差异有统计学意义。结果1血压、体重及血清指标的比较与WKY-C组大鼠相比，SHＲ-C组大鼠的血压明显升高，差异有统计学意义(P＜0．01)，然而，对于体重、BUN、SCr、BS、TG、TC及LDL-C，两组大鼠间的差异无统计学显著性，见图1、表1。Figure1．Thesystolicbloodpressure(SBP)andbodyweightoftherats．Mean±SD．n=10．＊＊P＜0．01vsWKY-Cgroup．图1大鼠收缩压和体重变化的比较表1大鼠BUN、SCr、BS、TG、TC及LDL-C的检测结果Table1．ThechangesofBUN，SCr，BS，TG，TCandLDL-Cintherats(Mean±SD．n=10)GroupBUN(mmol/L)SCr(μmol/L)TG(mmol/L)TC(mmol/L)LDL-C(mmol/L)BS(mmol/L)WKY-C8．32±1．1631．00±2．280．46±0．141．60±0．160．22±0．076．33±0．83SHＲ-C9．90±1．4531．17±4．620．43±0．111．52±0．070．17±0．046．45±0．672各组大鼠动脉血管形态学变化的比较2．1HE染色WKY-C组大鼠肠系膜小动脉及主动脉形态大致正常，各层分界清楚，血管内膜光滑，中膜无肥大增生、平滑肌排列规则，外膜无增厚。SHＲ-C组肠系膜小动脉管壁增厚，管腔狭窄，中层血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells，VSMCs)排列紊乱，外膜增厚明显，细胞增生;主动脉管壁增厚，以中层增厚最为明显，VSMCs肥大增生，中层弹性膜排列紊乱、疏松，厚薄不均且断裂，部分内膜脱落，见图2。2．2天狼星红-维多利亚蓝双染观察天狼星红-维多利亚蓝双染偏振光显微镜下观察，在明场时，胶原被染成红色，弹力纤维被染成

0．01或P＜0．05)。SHＲ-C组肠系膜小动脉与主动脉胶原面积百分比显著高于WKY-C组，且小动脉增加更明显(P＜0.01)，肠系膜小动脉弹性纤维面积百分比无统计学差异，弹性纤维面积与胶原面积比值显著低于WKY-C组大鼠(P＜0．05);但主动脉SHＲ-C组弹性纤维面积显著高于WKY-C组(P＜0．05)，弹性纤维面积与胶原面积比值的差异无统计学显著性(P＞0．05)，见图3～7。Figure3．ThestainingwithSiriusred-Victoriablueofthearterialtissuesintherats．TheA，C，EandGwereunderthelightfield，andtheB，D，FandHwereunderthedarkfield．AandB:WKY-Cgroupofmesentericsmallartery;CandD:SHＲ-Cgroupofmesentericsmallartery;EandF:WKY-Cgroupofaorta;GandH:SHＲ-Cgroupofaorta．图3大鼠动脉组织天狼星红-维多利亚蓝染色2．3Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布及表达使用激光共聚焦显微镜对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行荧光分析，胶原被染成绿色，细胞核被染成红色。WKY-C组大鼠动脉组织可见正常密度的胶原纤维，，Ⅰ型胶原纤维主要分布在外膜，Ⅲ型胶原主要分布在中膜及外膜;与其相比，SHＲ-C组动脉管壁细胞核数目增多，Ⅰ型胶原纤维增多，弥漫性分布于中膜平滑肌胞浆、间质以及外膜，Ⅲ型胶原亦增多，弥漫分布于中膜及外膜，大小动脉分布基本一致，但小动脉胶原增加更为显著，尤以外膜显著。荧光定量分析结果显示:与WKY-C组相比，SHＲ-C组Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达增多，且小动脉更为显著(P＜0．01)，尤以III型胶原最为明显(P＜0．01);主动脉以I型胶原增加为主，差异有统计学意义。Westernblot检测显示SHＲ-C组大、小动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达水平增加，与激光扫描共聚焦显微镜定量分析结果基本一致，见图8～10。2．4超微结构的变化透射电镜下WKY-C组血管超微结构正常，?
【作者单位】： 潍坊医学院;潍坊科技学院;山东大学附属千佛山医院保健科;
【基金】：山东省科技发展计划(No.2014GSF118043)
【分类号】：R544.1

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本文编号：2527145