基于有效部位组方的复方蛇龙胶囊降蛋白尿作用机理研究

发布时间：2019-11-13 03:11

【摘要】：目的：采用生物化学、组织化学及病理学等手段和方法，观察复方蛇龙胶囊对阿霉素所致大鼠肾损伤的保护作用及其降蛋白尿作用机制。方法：健康雄性清洁级SD大鼠100只，体重（180-220）g，适应性喂养1周后，随机选取10只，作为空白对照组，余90只大鼠采用两次小剂量尾静脉注射阿霉素法复制肾损伤模型，造模成功后（除空白对照组）随机分为模型对照组，阳性对照组，试验组（复方蛇龙胶囊低、中、高剂量组）5组，以雷公藤多甙片为阳性对照药，连续灌胃给药6周，并观察复方蛇龙胶囊对阿霉素所致大鼠肾损伤后大鼠一般状况和24尿蛋白定量。末次给药后留尿检测大鼠尿微量白蛋白（mALB），尿α1-微球蛋白（α1-MG），尿酶N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）；各组大鼠麻醉后，腹主动脉采血，制备血清，化学比色法检测血清中白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）、谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）等生化指标；分离肾组织，左侧部分肾组织制备组织匀浆，ELISA法检测肾组织中白介素-6（IL-6）、转化生长因子-β1（TGF-β1）；右侧肾组织-80℃保存，用于免疫组织化学观察血管内皮生长因子（VEGF）、硫酸肝素蛋白多糖（HSPG）、肾病蛋白（Nephrin）的表达；光镜和电镜下观察部分肾组织的一般形态和超微结构的变化。应用SPSS21.0统计软件进行统计学分析。结果：给药2周后，与空白组比较，模型组24小时尿蛋白定量显著升高（P0.05），与模型组比较，各治疗组蛋白尿有降低，差异没有统计学意义（P0.05），给药4、6周后，与模型比较，各治疗组蛋白尿显著降低（P0.05或P0.01）；与空白组比较，模型组大鼠尿液中α-MG、NAG和mALB显著升高（P0.01），与模型组比较，阳性对照组和试验中、高剂量组尿液中α-MG、NAG显著降低，，各给药组尿液中mALB显著降低（P0.05或P0.01）。与空白组比较，模型组大鼠血清TG、CHO显著升高，ALB显著降低（P0.01）；与模型组比较，阳性对照组和复方蛇龙胶囊高剂量组血清中TG、CHO显著降低，各给药组血清中ALB显著升高（P0.05或P0.01）。与空白组比较，模型组大鼠肾组织中IL-6、TGF-β1显著升高（P0.01），与模型组比较，阳性对照组和试验中、高剂量组肾组织中IL-6、TGF-β1显著升高（P0.01）；与空白组比较，模型组大鼠肾组织中VEGF显著升高，HSPG、Nephrin显著降低（P0.01），与模型组比较，阳性对照组和试验中、高剂量组肾组织中VEGF显著降低，HSPG、Nephrin显著升高（P0.01）。各组大鼠肾脏形态结构学改变在光镜下观察，模型组大鼠系膜细胞增多，系膜基质增生，肾小管扩张，电镜下模型组大鼠基底膜增厚，系膜细胞增多，伴基质增生，足突广泛融合。试验中、高剂量组与阳性组对肾损伤的形态结构均有明显保护作用。结论：复方蛇龙胶囊降低尿蛋白可能的机制为通过降低肾组织IL-6、TGF-β1，抑制VEGF、增强HSPG、Nephrin表达，缓解免疫炎症损伤，维护肾小球滤过屏障结构和功能。
【学位授予单位】：山西省中医药研究院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R285.5

【参考文献】