AQP5和CC16蛋白在大鼠失血性休克肺损伤中的表达及大黄附子汤干预作用的研究
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【摘要】:目的:探讨失血性休克复苏后大鼠肺脏AQP5和CC16蛋白表达变化意义及大黄附子汤的作用机理。方法:健康清洁级雄性SD大鼠,48只,随机分为3组:对照组(假手术组)、模型组(失血性休克复苏+生理盐水灌肠组),治疗组(失血性休克复苏+大黄附子汤灌肠组),每组16只,休克1h对模型组和治疗组进行干预,再分为干预后12h、24h将每8只大鼠再分为一个亚组。对照组先进行腹腔注射麻醉,然后依次在右颈总动脉,左股动脉和右股静脉进行插管操作并全身肝素化,而不进行失血性休克及复苏的处理。模型组和治疗组在对照组基础上制备失血性休克及复苏模型,以平均动脉压平稳在100mm Hg以上为复苏成功。模型组和治疗组在制模后12h、24h分别给予生理盐水、大黄附子汤2ml保留灌肠,对照组不进行任何操作。在各自时间点经腹主动脉取血,测定各组血浆内毒素含量,并通过ELISA对水通道蛋白5(AQP5)及血浆克拉拉细胞蛋白(CC16)含量进行检测。动物处死后,取左肺测湿/干重比,计算大鼠肺组织含水量,用显微镜观察并记录,采用免疫组化法测定肺组织克拉拉细胞蛋白(CC16)和水通道蛋白5(AQP5)表达。结果:1.大鼠血浆内毒素含量:与对照组比较,模型组明显较对照组高(P0.01)。治疗组与模型组比较,治疗组血浆内毒素含量在各个时间点均明显减少(P0.05)。2.大鼠血浆克拉拉细胞蛋白(CC16)含量:模型组高于对照组。治疗组与模型组比较,模型组血浆中CC16含量较治疗组高(P0.05)。3.大鼠肺组织匀浆水通道蛋白(AQP5含量)(ng/g):与对照组比较,模型组大鼠AQP5含量均降低(P0.05);与模型组比较,治疗组(即大黄附子汤组)大鼠AQP5含量均升高(P0.05)4.大鼠肺组织含水量(左肺湿/干比)检测:治疗组与模型组均高于对照组(P0.05)。而模型组肺组织各个时间段含水量均高于治疗组(P0.05)。5.HE染色光镜观察肺脏组织损伤:对照组肺泡结构完整,肺泡囊清晰,肺泡间隔正常。模型组肺泡间隔增宽,肺泡腔内有明显的出血渗出,中性粒细胞浸润。治疗组肺泡间隔清晰,肺泡腔内的出血渗出以及中性粒细胞浸润显著减轻,损伤评分有统计学差异(P0.01)。6.肺组织克拉拉细胞蛋白(CC16)免疫组化及评分:在肺脏中,细胞浆呈棕黄色为阳性染色,即为大鼠肺脏克拉拉细胞蛋白(CC16)。对照组评分明显高于模型组与治疗组,治疗组评分高于模型组(P0.05)。7.肺组织水通道蛋白5(AQP 5)免疫组化及评分:对照组评分明显高于模型组与治疗组,治疗组与模型组对比,治疗组评分升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:失血性休克时,大鼠肺脏AQP5蛋白及CC16蛋白参与急性肺损伤过程,大黄附子汤可以通过上调肺组织AQP5蛋白及CC16蛋白表达,减轻失血性休克后急性肺损伤的程度,有效防治失血性休克的进展。
【关键词】:失血性休克 急性肺损伤 大黄附子汤 水通道蛋白5 CC16蛋白 克拉拉细胞
【学位授予单位】:遵义医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R278
【目录】:
- 中英缩略词对照表4-5
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 前言10-12
- 材料与方法12-19
- 结果19-26
- 讨论26-30
- 结论30-31
- 参考文献31-35
- 综述35-44
- 参考文献40-44
- 致谢44-45
- 作者简介45
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