肿瘤间质细胞致瘤性与转移能力探究

发布时间：2020-05-18 13:04

【摘要】：背景:近年来随着癌症的发病率逐年上升,发病年龄低龄化,癌症已经成为威胁人们生命健康的几种主要疾病之一。除白血病之外,大多数肿瘤都以肿瘤块实体的形式存在。当肿瘤体积生长到一定程度时会出现肿瘤腔,肿瘤腔内各组分共同构成肿瘤间质,实体瘤便是由实质和间质构成。肿瘤实质的主要细胞成分为癌细胞,而肿瘤间质的细胞成分较肿瘤实质则更为复杂,主要由被癌细胞浸润的结缔组织、诱导的新生血管以及众多浸润性的白细胞细胞群构成,肿瘤间质细胞同时具有癌细胞和正常细胞的部分特性。肿瘤间质通过新生的血管为肿瘤的生长提供充足的氧和营养,其内部的肿瘤浸润的淋巴细胞群也具有抑制机体肿瘤免疫的功能。此外,肿瘤间质的血管集群也是肿瘤实质上脱落下来的癌细胞进入血液循环的桥梁,从原发肿瘤上脱落下来的游离性细胞也由肿瘤间质中的血管进入血液循环系统从而发生转移。肿瘤实质与间质具有不同程度的致瘤能力,但产生这种差异的原因有待进一步研究。目的:通过原位移植的方法建立4T1-GFP小鼠乳腺癌模型以获取肿瘤实质细胞与肿瘤间质细胞。对肿瘤相关基因趋化因子受体、Toll样受体以及整合素在两种肿瘤中的表达水平及变化和两种肿瘤重新接种后二者的致瘤能力进行分析,研究肿瘤间质细胞在肿瘤生长以及转移中的作用。方法:(1)4T1-GFP荷瘤小鼠建模:通过将体外培养的肿瘤细胞接种到小鼠乳腺脂肪垫中,构建荷瘤小鼠模型。(2)对趋化因子受体、Toll样受体和整合素等肿瘤相关基因在各肿瘤细胞中表达量变化进行检测分析。(3)将各肿瘤细胞重新接种到小鼠乳腺脂肪垫,观察各组小鼠肿瘤生长曲线、转移情况以及小鼠的生存曲线状况。结果:(1)在接种肿瘤细胞1周后接种部位可观测到有肿瘤生成,在接种两周后处死部分移植鼠和健康对照组,发现与正常小鼠相比移植组小鼠脾脏明显变大。统计肿瘤体积并绘制生长曲线发现肿瘤呈近似S型生长。在第六周处死解剖移植小鼠发现,肺部与肝部有转移瘤生成。(2)半定量PCR测定各基因家族(趋化因子受体、Toll受体、整合素)在不同肿瘤中表达量的变化发现,不同肿瘤各基因表达水平不同,肿瘤间质中CCR6、CXCR4、CXCR7、TLR2、ITGav等表达水平较高,肿瘤实质部分TLR1、TLR3表达水平较高。(3)根据观测到的各组肿瘤小鼠体内肿瘤生长曲线发现,移植肿瘤间质细胞组肿瘤转移能力较强,小鼠肿瘤生长较为迅猛,且存活时间较短;移植肿瘤实质细胞组小鼠肿瘤生长缓慢,且小鼠存活时间较长。结论:通过乳腺脂肪垫接种肿瘤细胞的方法,成功建立4T1-GFP乳腺癌荷瘤小鼠模型;通过半定量PCR检测发现肿瘤实质细胞与肿瘤间质的各基因表达水平有所差异;成功证实相比肿瘤实质细胞,肿瘤间质细胞具有更强的致瘤性,且成瘤后肿瘤细胞增殖能力和转移能力更强,从而为肿瘤治疗提供更明确地靶点。
【图文】：

图 1.1 肿瘤微环境的细胞构成Figure 1.1 Cell composition of tumor microenvironment注：肿瘤相关基质细胞具有不同的细胞构成。已发现肿瘤相关基质细胞（TASC）至少 6 种不同的类群：成纤维细胞，周细胞，骨髓 MSC，脂肪细胞，已发生内皮间质转化的内皮细胞（EndMT）或已成肿瘤细胞上皮至间充质转变（EMT）。这些细胞的表型通过可溶性因子、微小 RNA、外来体的作用行转换，形成 TASC 特有亚型如 EMT，或 EndMT、与癌症相关的脂肪细胞（CAA）或癌症相关内皮（CAEC）(Midgley et al. 2013)。大量证据表明，在肿瘤微环境中细胞可以进行“转分化”，从基质细胞应性基质细胞以及从肿瘤相关基质细胞。最常见的细胞分化是在反应性基质期间成纤维细胞转分化成为活化的肌成纤维细胞(Midgley et al. 2013)。有证明，这种现象既是一种再分化进程(Untergasseretal.2005)，也是一种转分化(Midgley et al. 2013)，这取决于具体情况。其他临床病例也有周细胞转分化皮细胞或成纤维细胞的证据，证明其能够形成肿瘤相关基质细胞（TAS(Deruiter et al. 1997)。另一方面，有证据表明癌细胞能够促进基质样细胞转以促进肿瘤进展。Scully 等人(Scully et al. 2012)发现胶质母细胞瘤干细胞样能够转分化为基底样内皮细胞以促进血管的生成。Twist1 通过 Jagged1/KLF

沈阳农业大学硕士学位论文剂的用量约为 55μL，，则麻醉剂的用量此时的麻醉效果最好。模型的评价细胞约 1 周后，在接种位点出现了疑似增长趋势较为平稳，接种第 2 周，麻醉剖取脾脏通过与正常对照组小鼠对比观细胞一段时间后，脾脏体积明显大于正数发现移植肿瘤细胞后荷瘤小鼠脾指接种 3 周后肿瘤块生长速度明显加快，小鼠出现腹腔积水的情况，小鼠较为萎变化绘制成小鼠肿瘤生长曲线（图 2-3瘤小鼠，可观察到部分移植组小鼠肿瘤乳腺癌荷瘤小鼠模型构建成功
【学位授予单位】：沈阳农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R73-3

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 丁运良;;恶性肿瘤间质及病理临床意义[J];中国现代医药杂志;2006年11期

2 林志芳;贾冰;全毅;柯尊彬;李海珠;岑丽莲;梅敏;;介入联合肿瘤间质治疗肝癌患者免疫功能变化及其与预后的关系[J];广东医学;2012年15期

3 赵志德,李玉林,寇伯君,吴珊,韩英杰,鲁学军;膀胱移行细胞癌增殖细胞核抗原与肿瘤间质微血管密度的表达与临床及预后的意义[J];中国肿瘤临床;2000年04期

4 杜华贞;和瑞芝;赵卫星;千高峰;何茶叶;刘兴莉;;纤维源性肿瘤间质肥大细胞反应与预后的关系[J];新乡医学院学报;1991年04期

5 杜华贞,和瑞芝,赵卫星,千高峰,何茶叶,刘兴莉;纤维源性肿瘤间质肥大细胞反应与预后的关系[J];临床与实验病理学杂志;1993年S1期

6 陈亚军;孙鹏飞;石学涛;;肿瘤间质比用于肿瘤预后评价的研究进展[J];中国现代普通外科进展;2016年09期

7 王大志;赵许亚;何伟;周石;;介入治疗法联合肿瘤间质治疗方法对肝癌患者免疫功能的影响分析[J];中国继续医学教育;2015年25期

8 李蜀光;毛祖彝;;恶性肿瘤间质内液压增高[J];国外医学.口腔医学分册;1993年06期

9 赵以军;;介入联合肿瘤间质治疗肝癌患者免疫功能变化的临床分析[J];中国医药指南;2013年28期

10 周乐;和平;王艳;屈建强;王一理;;肿瘤间质灌注液蛋白质组学研究[J];西安交通大学学报(医学版);2009年03期

相关会议论文 前9条

1 赵明;李安民;傅相平;张志文;查炜光;易林华;;肿瘤间质内放疗治疗基底节区胶质细胞瘤[A];中国医师协会神经外科医师分会首届全国代表大会论文汇编[C];2005年

2 李玉林;;肿瘤间质血管发生及消退机制的研究[A];中国科协2001年学术年会分会场特邀报告汇编[C];2001年

3 彭亚男;李宗伟;李卓玉;;结肠癌细胞通过直接接触促进人骨髓间充质干细胞向肌纤维母细胞分化[A];第四届泛环渤海生物化学与分子生物学会学术交流会论文集[C];2013年

4 包慈航;程玉峰;;放射后的间质成纤维细胞通过肿瘤间质相互作用促进食管癌细胞的侵袭[A];第八届中国肿瘤学术大会暨第十三届海峡两岸肿瘤学术会议论文汇编[C];2014年

5 吴健;蔡贤磊;钱泽;吕震;郑树森;;肿瘤问质比对肝癌肝移植患者预后的评估作用[A];2015年浙江省外科学学术年会暨国家级肝胆胰疾病诊治进展学习班论文汇编[C];2015年

6 浏丹;许世雄;王庆伟;M.W.Collins;赵改平;吴洁;;球形实体肿瘤中大分子药物输运模型的初步研究[A];2005年上海市生物医学工程学会学术年会论文集[C];2005年

7 王兆峰;刘红兵;赵仁德;张鹤;刘春花;宋勇;;肿瘤间质比(TSR)是非小细胞肺癌独立的预后因素[A];第13届全国肺癌学术大会论文汇编[C];2013年

8 孙立;林森森;梁文璐;房冬冬;赵人平;周力强;刘大涛;黄岚;周华;张陆勇;袁胜涛;;针对间质细胞的抗肿瘤及抗肿瘤转移多肽类药物的研究[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年

9 荣丽洁;秦志海;;间质成纤维细胞基因改变利于肿瘤免疫负调控微环境的形成[A];第九届全国免疫学学术大会论文集[C];2014年

相关博士学位论文 前4条

1 张星霖;肿瘤间质比是鼻咽癌的独立预后指标[D];山东大学;2015年

2 姚勤;CLIC4参与上皮性卵巢癌肿瘤间质相关成纤维细胞的转化及其microRNAs调控[D];山东大学;2009年

3 张斌;CD39/CD73分子在胃肠癌患者中的表达及临床意义研究[D];第二军医大学;2015年

4 全毅;TACE联合肿瘤间质注射碘油化疗药物治疗肝癌的临床研究[D];南方医科大学;2010年

相关硕士学位论文 前10条

1 韦智明;肿瘤间质细胞致瘤性与转移能力探究[D];沈阳农业大学;2018年

2 邱协;肺癌肿瘤间质细胞和气腔扩散的关系研究[D];苏州大学;2018年

3 徐军;肿瘤间质比在非小细胞肺癌中的预后作用研究[D];山东大学;2016年

4 王婷;肿瘤间质实质比例与血管生成、淋巴管生成之间的关系[D];山东大学;2014年

5 黄春生;肿瘤间质比例对胃癌根治术预后的影响[D];广西医科大学;2014年

6 李欢;肿瘤间质比对胆囊癌的预后预测价值研究[D];青岛大学;2017年

7 蔡贤磊;肿瘤间质比对肝癌肝移植患者预后的评估作用[D];浙江大学;2015年

8 余南彬;肺癌组织中巨噬细胞浸润与肺癌预后关系的研究[D];四川大学;2007年

9 牟联军;肌成纤维细胞在食管癌组织中的分布及可能的病理学意义[D];汕头大学;2007年

10 张金石;双色荧光示踪胶质瘤原位移植模型的建立及其恶变的肿瘤间质细胞耐辐射特性的研究[D];苏州大学;2014年

本文编号：2669759