利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的药代动力学特征

发布时间：2017-03-26 20:12

  本文关键词：利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的药代动力学特征，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的1.研究不同剂量的葛根素通过腹腔注射给药在正常大鼠的血液和主要脏器以及大脑内亚器官的组织分布代谢的动态变化过程。2.研究不同剂量葛根素通过腹腔注射给药在脑缺血再灌注损伤模型大鼠的血液和主要脏器以及脑内损伤部位左右海马的组织分布代谢的动态变化过程。3.比较研究不同剂量的葛根素通过腹腔注射给药在正常大鼠和脑缺血再灌注损伤模型大鼠中的组织分布代谢的异同,以期为临床用药提供药代动力学的数据支持。方法1.三组不同剂量的葛根素在正常大鼠的组织分布药代动力学研究：按照高剂量组(80mg/kg)、中剂量组(40mg/kg)、低剂量组(20mg/kg)腹腔注射葛根素,于给药后第5、15、30、60、90、120、180、240、300、360分钟麻醉后腹主动脉取血,取血后通过心脏灌洗,取心、肝、脾、肺、肾、海马、皮层、纹状体。样品通过匀浆和离心处理后,利用间接竞争ELISA法检测样品中的葛根素的含量。2.三组不同剂量的葛根素在脑缺血再灌注损伤模型(MCAO)大鼠的组织分布药代动力学研究：利用线栓法制备MCAO模型大鼠,缺血90min后再灌注的同时按照高剂量组(80mg/kg)、中剂量组(40mg/kg)、低剂量组(20mg/kg)腹腔注射葛根素,于给药后第5、15、30、60、90、120分钟后腹主动脉取血,取血后通过心脏灌洗,取心、肝、脾、肺、肾、左侧海马和右侧海马。样品通过匀浆和离心处理后,利用间接竞争ELISA法检测样品中的葛根素的含量。结果1不同剂量的葛根素在正常大鼠中的组织分布代谢特征1.1在血液中的药代动力学特征在高、中剂量组中,葛根素在大鼠血液中均出现了两个吸收峰。低剂量组仅有一个吸收峰。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05)。Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。1.2在心脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在心脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),max和MRT均无显著性差异(P0.05)。1.3在肝脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在肝脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。1.4在脾脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在脾脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),MRT均无显著性差异(P0.05),高剂量组与中、低剂量组的Tmax有显著差异(P0.05),高剂量组的Tmax比中剂量组的低剂量组往后延长了15分钟。1.5在肺脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在肺脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。1.6在肾脏中的药代动力学特征在高剂量组和中剂量组中,葛根素在肾脏中均出现了两个吸收峰。低剂量组仅有一个吸收峰,在给药后第15分钟。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),MRT均无显著性差异(P0.05)。高剂量组与中、低剂量组的Tmax有显著差异(P0.05),高剂量组的达峰时间比中剂量组的低剂量组往前提前了10分钟。1.7在海马中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在海马的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。1.8不同剂量的葛根素在皮层中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在皮层的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。1.9在纹状体中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在纹状体的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2不同剂量的葛根素在脑缺血再灌注损伤模型大鼠中的组织分布药代动力学特征2.1在血液中的药代动力学特征高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05)。Tmax无显著性差异(P0.05)。高剂量组和中剂量组的葛根素的MRT无明显差异(P0.05),而在高剂量组和低剂量组,中剂量组和低剂量组之间均有显著性差异(P0.05)。2.2在心脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在心脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2.3不同剂量的葛根素在肝脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在肝脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2.4在脾脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在脾脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2.5在肺脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在肺脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2.6在肾脏中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在肺脏的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2.7在左侧海马中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在海马的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。2.8在右侧海马中的药代动力学特征三组不同剂量的葛根素在皮层的组织分布代谢过程中均只出现了一个吸收峰,药-时代谢曲线趋势基本一致。高、中、低三组不同剂量的Cmax和AUC均有显著性差异(P0.05),Tmax和MRT均无显著性差异(P0.05)。结论1.1葛根素在脑缺血再灌注损伤模型大鼠中的组织分布代谢过程中,在血液和组织器官的达峰时间均较正常组延长。1.2高剂量组的葛根素在模型组海马中的分布的量明显比正常组的高。1.3高剂量和中剂量的葛根素在模型组的海马中的代谢速度较正常大鼠的快。1.4低剂量的葛根素在模型组损伤部位的海马比未损伤部位的海马滞留时间更长,作用时间更长,清除更为缓慢。
【关键词】：葛根素 间接竞争ELISA 脑缺血再灌注损伤模型 药代动力学 组织分布
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 摘要7-11
• ABSTRACT11-16
• 第一部分 文献综述16-32
• 综述一：葛根素治疗脑缺血损伤神经保护作用机制研究进展16-25
• 1 拮抗细胞内钙离子的超载16-17
• 2 抑制炎症反应17-18
• 3 减轻兴奋性氨基酸毒性18-19
• 4 抑制氧化应激反应19
• 5 促进血管内皮生长因子表达19-20
• 6 减轻脑水肿20
• 7 增加脑血流量20-21
• 8 讨论21-22
• 参考文献22-25
• 综述二：葛根素药代动力学研究进展25-32
• 1 样品前处理25-26
• 1.1 组织样品预处理26
• 1.2 血液样品的预处理26
• 2 样品检测26-27
• 3 葛根素不同制剂的吸收27-28
• 3.1 葛根素体内分布27
• 3.2 葛根素体内代谢27-28
• 4 讨论28-29
• 参考文献29-32
• 前言32-34
• 第二部分 实验研究34-89
• 实验一：利用免疫分析法解析葛根素在正常大鼠中的组织代谢分布研究34-53
• 1 材料34-35
• 1.1 实验动物与分组34
• 1.2 实验试剂34
• 1.3 主要仪器耗材34-35
• 2 方法35-38
• 2.1 试剂配制35-36
• 2.2 给药36
• 2.3 取材36-37
• 2.4 样品处理37
• 2.5 样品检测37
• 2.6 数据处理37-38
• 3 结果38-48
• 3.1 葛根素在正常大鼠血液中的代谢情况38-39
• 3.2 葛根素在正常大鼠心脏中的代谢情况39
• 3.3 葛根素在正常大鼠肝脏中的代谢情况39-40
• 3.4 葛根素在正常大鼠脾脏中的代谢情况40-41
• 3.5 葛根素在正常大鼠肺脏中的代谢情况41-42
• 3.6 葛根素在正常大鼠肾脏中的代谢情况42-43
• 3.7 葛根素在正常大鼠海马中的代谢情况43-44
• 3.8 葛根素在正常大鼠皮层中的代谢情况44-45
• 3.9 葛根素在正常大鼠纹状体中的代谢情况45-46
• 3.10 高剂量组、中剂量组和低剂量组葛根素在血液和组织器官中的曲线下面积AUC(ng·min/ml)46-47
• 3.11 高剂量组、中剂量组和低剂量组的葛根素在血液和组织中的达峰浓度Cmax(ng/ml)47-48
• 4 讨论48-53
• 4.1 不同剂量的葛根素在血液中的药代动力学特征48-49
• 4.2 不同剂量的葛根素在心脏中的药代动力学特征49
• 4.3 不同剂量的葛根素在肝脏中的药代动力学特征49
• 4.4 不同剂量的葛根素在脾脏中的药代动力学特征49-50
• 4.5 不同剂量的葛根素在肺脏中的药代动力学特征50
• 4.6 不同剂量的葛根素在肾脏中的药代动力学特征50
• 4.7 不同剂量的葛根素在海马中的药代动力学特征50-51
• 4.8 不同剂量的葛根素在皮层中的药代动力学特征51
• 4.9 不同剂量的葛根素在纹状体中的药代动力学特征51
• 4.10 不同剂量的葛根素在不同脏器之间的组织分布51-53
• 实验二：葛根素在脑缺血再灌注损伤模型大鼠中的组织分布药代动力学研究53-71
• 1 材料53-54
• 1.1 实验动物与分组53
• 1.2 实验试剂53
• 1.3 主要仪器耗材53-54
• 2 方法54-57
• 2.1 试剂配制54-55
• 2.2 MCAO模型制备与给药55-56
• 2.3 取材56
• 2.4 样品处理56
• 2.5 样品检测56-57
• 2.6 数据处理57
• 3 结果57-67
• 3.1 葛根素在MCAO模型大鼠血液中的代谢57-58
• 3.2 葛根素在MCAO模型大鼠心脏中的代谢58-59
• 3.3 葛根素在MCAO模型大鼠肝脏中的代谢59-60
• 3.4 葛根素在MCAO模型大鼠脾脏中的代谢60-61
• 3.5 葛根素在MCAO模型大鼠肺脏中的代谢61-62
• 3.6 葛根素在MCAO模型大鼠肾脏中的代谢62-63
• 3.7 葛根素在MCAO模型大鼠左侧海马中的代谢63-64
• 3.8 葛根素在MCAO模型大鼠右侧海马中的代谢64-65
• 3.9 高剂量组、中剂量组和低剂量组的葛根素在MCAO模型大鼠血液和组织器官的曲线下面积AUC(ng-min/ml)65-66
• 3.10 高剂量组、中剂量组和低剂量组的葛根素在MCAO模型大鼠血液和组织器官的达峰浓度Cmax(ng/ml)66-67
• 4 讨论67-71
• 4.1 不同剂量的葛根素在血液中的药代动力学特征67-68
• 4.2 不同剂量的葛根素在心脏中的药代动力学特征68
• 4.3 不同剂量的葛根素在肝脏中的药代动力学特征68
• 4.4 不同剂量的葛根素在脾脏中的药代动力学特征68
• 4.5 不同剂量的葛根素在肺脏中的药代动力学特征68-69
• 4.6 不同剂量的葛根素在肾脏中的药代动力学特征69
• 4.7 不同剂量的葛根素在左侧海马中的药代动力学特征69
• 4.8 不同剂量的葛根素在右侧海马中的药代动力学特征69-70
• 4.9 不同剂量的葛根素在组织分布中的药代动力学特征70-71
• 实验三：葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠中的组织分布药代动力学比较71-89
• 1 材料71
• 2 方法71
• 3 结果71-85
• 3.1 不同剂量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠血液中的药代动力学特征差异71-73
• 3.2 不同剂量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠心脏中的药代动力学特征差异73-75
• 3.3 不同剂量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠肝脏中的药代动力学特征差异75-77
• 3.4 不同剂量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠脾脏中的药代动力学特征差异77-79
• 3.5 不同剂量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠肺脏中的药代动力学特征差异79-81
• 3.6 不同剂量的葛根素在正常大鼠和MCAO模型大鼠肾脏中的药代动力学特征差异81-83
• 3.7 比较不同剂量的葛根素在正常大鼠的海马和MCAO模型大鼠左侧海马、右侧海马中的药代动力学特征差异83-85
• 4 讨论85-88
• 5 小结88-89
• 结语89-90
• 参考文献90-92
• 附录92-93
• 致谢93-94
• 在学期间主要研究成果94-95
• 个人简历95

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