枸杞叶总黄酮对小鼠脑缺血再灌注的保护作用

发布时间：2020-07-23 11:57

【摘要】：目的:通过建立小鼠脑缺血再灌注模型,探究枸杞叶总黄酮对小鼠脑缺血再灌注的保护作用,并从其抗氧化活性和对ATP酶活性影响方面探讨可能机制,以期为枸杞叶总黄酮作为保护脑缺血药物的应用提供药理学的参考。方法:出生2月龄的60只健康雄性昆明小鼠,随机分为6个小组(每组10只),假手术组、模型组、枸杞叶总黄酮低剂量组(30mg/kg)、枸杞叶总黄酮中剂量组(100mg/kg)、枸杞叶总黄酮高剂量组(300mg/kg)和尼莫地平组(20mg/kg)。枸杞叶总黄酮组和尼莫地平组小鼠灌胃给药(0.1ml/10g),假手术组、模型组小鼠给予双蒸水(0.1ml/10g),每天一次,连续给药十四天后,小鼠用10%的水合氯醛腹腔注射麻醉后进行双侧颈总动脉结扎,缺血15分钟后复灌10分钟,再缺血15分钟复灌24小时后处死,取脑称重,计算脑指数,然后在110℃烤至恒重,计算脑含水量。通过试剂盒检测小鼠脑组织中SOD活性、MDA含量及Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-ATP酶的活性。通过HE染色观察大脑皮质及海马CA1区的神经元形态学变化。结果:1.枸杞叶总黄酮对小鼠缺血再灌注后脑指数和脑含水量的影响:在脑缺血再灌注模型中,高剂量的枸杞叶总黄酮能够有效降低小鼠的脑指数和脑含水量(与模型组相比,P0.05,n=10)。2.枸杞叶总黄酮对小鼠缺血再灌注后大脑脂质过氧化程度的影响:假手术组SOD活力和MDA含量水平分别为110±3.9Uml和6.1±0.4nmol/ml。模型组脑组织的SOD活力降低至99.7±4.1Uml(与假手术组相比P0.05,n=10),MDA含量水平升高至9.9±0.9 nmol/ml(与假手术组相比P0.05,n=10)。高剂量的枸杞叶总黄酮预处理后能显著减轻大脑的脂质过氧化程度,小鼠脑组织内的SOD活性明显提高(与模型组相比,P0.05,n=10),MDA的含量水平降低(与模型组相比,P0.05,n=10)。3.枸杞叶总黄酮对小鼠缺血再灌注后脑组织中Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶的影响:假手术组Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶水平分别为1.77±0.50μmol/mgprot/h和1.85±0.47μmol/mgprot/h。模型组脑组织的Na~+-K~+-ATP酶活力降低至1.07±0.30μmol/mgprot/h(与假手术组相比P0.05,n=10),Ca~(2+)-ATP酶活力降低至1.16±0.27μmol/mgprot/h(与假手术组相比P0.05,n=10)。高剂量的枸杞叶总黄酮预处理后能显著抑制Na~+-K~+-ATP酶、Ca~(2+)-ATP酶活性下降(与模型组相比,P0.05,n=10)。4.枸杞叶总黄酮对缺血再灌注小鼠大脑皮质以及海马神经元形态学的影响:小鼠双侧颈总动脉结扎(2VO)缺血15分钟再灌注24小时后,取小鼠脑组织进行HE染色发现模型组的小鼠大脑皮质及海马CA1区神经元有明显的损害,可观察到细胞核浓缩、核消失、神经元缺失等现象,正常的神经元数目减少。枸杞叶总黄酮预处理后则明显减轻了大脑皮质及海马CA1区神经元的损伤情况。结论:枸杞叶总黄酮对于脑缺血具有保护作用,能够有效减轻脑缺血再灌注所引起的神经元损伤。其脑缺血的保护作用机制可能与提高机体抗氧化应激水平、保护脑组织ATP酶活性和改善离子转运有关。
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5

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