加味益气聪明汤对VD大鼠海马神经元突触可塑性的影响

发布时间：2017-04-03 09:00

  本文关键词：加味益气聪明汤对VD大鼠海马神经元突触可塑性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究加味益气聪明汤对血管性痴呆(VD)大鼠行为学及大鼠海马神经元突触结构、海马区胆碱能神经递质乙酰胆碱(Ach)、胆碱酯酶(Ach E)、大脑皮层单胺类递质5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)的影响,初步阐明加味益气聪明汤治疗血管性痴呆的作用机制。方法:1.分组:在Morris水迷宫实验中,通过观察大鼠游泳轨迹及记录相应的时间,选择记忆能力相似的60只雄性SD大鼠,采用随机的原则分为12只假手术组和48只手术组:模型组、尼莫地平组(简称“对照1组”)、复方苁蓉益智胶囊组(简称“对照2组”)、加味益气聪明汤组(简称“实验组”)。手术组采用一次手术先后结扎左右颈总动脉(CCA)制备VD模型;假手术组在手术过程中只是把左右颈总动脉与神经分离暴露出来,不需要结扎双侧血管。2.给药:对照1组予以尼莫地平6.25mg/kg/d灌胃,对照2组予以复方苁蓉益智胶囊0.375g/kg/d灌胃,实验组选用加味益气聪明汤以14.58g/kg/d的剂量给药,假手术组、模型组灌胃均选用蒸馏水,按照所有药物各自所需剂量配制成2ml/d给药,一共持续30天。3.取材:5组内分别随机抽取2只(共10只)大鼠麻醉后行心脏灌注多聚甲醛内固定取脑组织,准备电镜观察的切片;每组各剩下的10只大鼠断头处死后剥离双侧海马及大脑皮层,各自捣碎配液离心提取海马组织匀浆及大脑皮层匀浆,保存在-20℃冰箱待测。4.指标的检测方法:各组大鼠的行为学变化主要通过水迷宫实验进行检测;海马区Ach的含量选用ELISA法测定;海马区Ach E的含量选择分光光度法测定;大脑皮层区5-HT、DA、NE的含量主要选择荧光分光光度法测定;在电镜下观察各组海马区神经元突触超微结构的变化。结果:(1)行为学变化:(a)定位航行结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期(EL)明显延长,差异有统计学意义(P0.01),对照1组、对照2组及实验组EL有所延长,差异无统计学意义(P0.05);与模型组比较,对照1组、对照2组、实验组的EL明显缩短,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);对照1组、对照2组及实验组各组两两之间比较EL有所不同,但差异无统计学意义(P0.05)。(b)空间探索实验:与假手术组比较,模型组大鼠经过有效区及平台的次数显著减少,停留在平台及有效区的时间显著缩短,差异有统计学意义(P0.01);与模型组相比,对照1组、对照2组、实验组经过平台及有效区的次数增多显著,平台及有效区停留时间延长明显,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);对照1组、对照2组、实验组各组之间两两比较,经过平台及有效区的时间以及跨越平台及有效区的次数无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。(2)ELISA检测结果:与假手术组比较,模型组大鼠海马区Ach含量明显降低,而海马区Ach E含量明显增多,差异有统计学意义(P0.01),对照1组、对照2组及实验组较假手术组大鼠海马区Ach含量降低,而在海马区的Ach E含量增高,差别均有统计学意义(P0.01);与模型组相比,对照1组、对照2组及实验组大鼠海马区Ach含量增多较为显著,而Ach E含量降低明显,差别有统计学意义(P0.01);与对照1组比较,对照2组大鼠海马区Ach含量降低明显,而海马区Ach E的含量升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),实验组大鼠海马区Ach含量降低,Ach E含量有所增高,差异无统计学意义(P0.05);与对照2组比较,实验组海马区Ach含量轻微增高,Ach E含量稍有降低,但差异无统计学意义(P0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠皮层区NE、DA、5-HT明显降低,差异有统计学意义(P0.01),对照1组、对照2组以及实验组大鼠皮层区NE、DA、5-HT含量减低,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,对照1组、对照2组、实验组大鼠皮层区NE、DA、5-HT明显增多,差异有统计学意义(P0.01);与对照1组比较,对照2组大鼠皮层区NE、DA、5-HT含量减少,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),实验组大鼠皮层区NE、DA、5-HT含量有所降低,但差异无统计学意义(P0.05)。对照2组与实验组之间皮层区NE、DA、5-HT含量变化不大,差异无统计学意义(P0.05)(3)电镜结果:假手术组大鼠海马区突触密集度高,结构清晰,突触的各组成成分可被清楚辨认,在突触后致密区可见较深的染色,密度高。模型组突触前膜内的线粒体嵴变得模糊、肿胀明显,突触结构模糊欠清,突触数目减少甚多,在突触后致密区可见较浅的染色,密度不高。与假手术组相比,模型组大鼠海马区突触数目减少明显,突触间隙增宽,突触后致密区染色变浅;与模型组相比,对照1组、对照2组和实验组大鼠海马区突触显著增多,突触间隙宽度变小,突触后致密区染色变深、突触活性区长度变长;假手术组与对照1组、对照2组、实验组之间两两比较,上述突触结构参数之间的变化较小。结论:1.结扎双侧CCA可成功制备与海马区相关的学习记忆障碍的VD模型。2.加味益气聪明汤可改善VD大鼠的学习记忆功能以及大鼠海马区神经元的突触结构与功能。3.加味益气聪明汤对VD的作用机制可能:改善海马区神经元突触结构的缺血缺氧状态,恢复突触的正常结构及提高突触传递效能;通过促进海马区胆碱能神经递质对Ach的释放以及抑制海马区对Ach E的合成,从而增加海马区Ach的含量和减少Ach E的含量;促进修复后的突触囊泡对NE、DA、5-HT的释放,从而提高其在大脑皮层内的含量;并且可通过降低海马区Ach E的含量,达到维持海马神经元的信息传递功能的完整性的目的,从而起到改善学习记忆的能力。
【关键词】：加味益气聪明汤 血管性痴呆 突触可塑性 作用机制
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-14
• 前言14-21
• 材料与方法21-30
• 结果30-41
• 讨论41-59
• 结论59-60
• 参考文献60-69
• 英汉缩略词对照表69-70
• 致谢70-71
• 突触可塑性的中医药调控研究进展（综述）71-94
• 参考文献85-94

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 石苗茜;刘卫平;;血管性痴呆发病机制研究进展[J];第四军医大学学报;2007年09期

2 陈福勤;于海默;杨嘉颐;龚华强;于佳澜;戴中;柳洪胜;白文;;复方苁蓉益智胶囊预防缺血性中风后认知损害的临床研究[J];北京中医药;2014年05期

3 刘霞;包翠芬;魏嘉;梁佳;秦书俭;;人参皂苷Rg1对脑缺血-再灌注大鼠海马CA1区神经元的保护作用及机制[J];解剖科学进展;2010年02期

4 刘亚明;郭继龙;刘必旺;刘丙辰;张慧忠;周保腾;张芳;梁红娟;;中药地龙的活性成分及药理作用研究进展[J];山西中医;2011年03期

5 杨红卫;王翔宇;;ErkⅠ/Ⅱ介导姜黄素对慢性脂多糖诱导的脊髓突触可塑性损害的拮抗作用[J];时珍国医国药;2013年05期

6 纪慧;田华;刘富;刘冰华;李杰;;葛根素对血管性痴呆小鼠脑组织AchE及Na~+-K~+-ATP酶活性的影响[J];齐齐哈尔医学院学报;2013年21期

7 高磊;张宪忠;刘相静;徐延俊;王美娇;陈龙霏;张允岭;;复方苁蓉益智胶囊治疗中风后轻度认知障碍的临床研究[J];世界中西医结合杂志;2015年01期

8 方永奇,匡忠生,谢宇辉,李翎,吴启端,魏刚,林双峰;石菖蒲对缺血再灌注脑损伤大鼠神经细胞凋亡的影响[J];现代中西医结合杂志;2002年17期

9 张建东,侯一平,宋焱峰,张朗;大豆磷脂酰胆碱提高幼年大鼠学习记忆能力及对海马CA3区突触可塑性的影响[J];中国临床康复;2005年04期

10 汪忠波;郑清平;;三七总皂苷对小鼠学习记忆及脑内乙酰胆碱酯酶的影响[J];湖北职业技术学院学报;2009年04期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 张吉仲;益智五海胶囊治疗血管性痴呆的作用机理研究[D];成都中医药大学;2009年

  本文关键词：加味益气聪明汤对VD大鼠海马神经元突触可塑性的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：284022