孕、哺期高脂饮食对子代小鼠生长、代谢的影响及机制探讨
本文关键词:孕、哺期高脂饮食对子代小鼠生长、代谢的影响及机制探讨,,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的本研究采用在不同时期(孕期/哺乳期)给予小鼠高脂饲料喂养,通过观察小鼠妊娠后胎鼠宫内生长情况以及出生后哺乳期生长情况,探讨母体在不同时期高脂饮食致子代宫内生长代谢异常以及子代出生后生长代谢异常情况及其潜在的机制。本次研究为预防母体高脂饮食引起的子代生长、发育异常提供科学的实验依据。方法实验动物为ICR雌性小鼠,从8周龄适应性喂养一周后合笼。根据受孕情况将孕鼠随机分为两组,每组12只,即普通饮食对照(C)组、高脂饮食(H)组,母鼠分娩后每组再随机分成两组(C)组、(H)组,分成四组:CCD,CHD,HCD,HHD。于孕18天,10%水合氯醛(0.3ml/kg)麻醉处死孕鼠,分离出胎鼠和胎盘,测量胎鼠体重、胎盘重量、血清等生化指标;泌乳量从第一天开始每三天测一次,持续到出生后18天(PND18)。于PND14取各组母鼠乳汁,记录子代小鼠出生后至PND21体重,于第21天麻醉剖杀小鼠,留取血清、肝脏等样本,记录肝脏、肾脏、脏器周围脂肪重量,测量空腹血糖等指标。采用放射免疫法分析血清胰岛素、胰高血糖素,试剂盒测量血清胆固醇、甘油三酯。RT-PCR的方法检测胎盘、仔鼠肝脏组织中基因的表达水平,采用Western Blot的方法检测胎盘、肝脏组织中蛋白的表达水平。结果孕期末(GD18),高脂组胎盘重量(P=0.004)、仔鼠的血糖水平(P=0.008)、血清总胆固醇水平(P=0.014)显著高于对照组;血清TG、平均窝重、胰高血糖素水平无统计学差异;血清胰岛素水平低于对照组(P=0.058)。高脂组胎盘组织中FATP4基因表达水平显著上调(P=0.034),FATP4蛋白表达水平有上调趋势上调,但未出现统计学差异。泌乳量从第六天起CHD、HHD组开始高于CCD组且一直持续到哺乳期末。在PND14取乳汁测得乳汁成分各组间无统计学差异。雌、雄仔鼠分别从第六天起CHD、HHD组体重开始高于CCD组且一直持续到哺乳期末,在PND21,雄性仔鼠体重其他三组均显著高于CCD组,且HHD组最高;雌性仔鼠中,HHD组体重显著高于其他三组(P0.05),CHD、HCD组体重高于CCD组(P0.05)。CHD、HHD组血糖水平雌、雄皆高于CCD组,差异有统计学意义。子代中,雌、雄肝脏重量、脏器周围脂肪CHD、HHD组重量均高于CCD、HCD组;雄鼠血清TC水平CHD、HHD组均高于CCD、HCD组(P0.05),雌鼠HHD组显著高于其他三组(P0.05);雄鼠血清TG水平HCD组高于CHD组,雌鼠CCD组高于哺乳期高脂组(CHD、HHD),差异有统计学意义。子代雄鼠血清胰岛素水平CCD组高于CHD、HCD组,差异有统计学意义,胰高血糖素水平CHD组雌、雄均高于HCD组,差异有统计学意义。在PND21,肝脏病理切片显示哺乳期高脂组(CHD、HHD)均有不同程度脂肪堆积,哺乳期普通饮食组(CCD,HCD)组未发现明显脂肪堆积现象。雄鼠肝脏组织q RT-PCR结果提示:雄鼠CHD组Srebp-1、FATP4、SCD-1较其他三组上调,CCD、HCD、HHD三组间无统计学差异,提示单纯哺乳期高脂饮食较其他时期高脂饮食刺激效果更为明显。Western-Blot结果显示:仔鼠肝脏组织HHD组FATP4蛋白表达反而下降,CD36、Srebp-1则未发现明显差异。结论母鼠哺乳期高脂饮食导致了子代生长、代谢紊乱和泌乳量的变化,孕期高脂饮食会加重此现象,引起仔鼠生长、代谢改变的原因是由于摄入乳汁量的增加而非乳汁成分的改变。
【关键词】:孕期 哺乳期 高脂饮食 胎盘 乳汁
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R153.1
【目录】:
- 英文缩略词5-6
- 中文摘要6-8
- Abstract8-11
- 1 引言11-12
- 2 材料和方法12-24
- 3 结果24-35
- 4 讨论35-38
- 5 结论38-39
- 6 参考文献39-45
- 附录45-47
- 致谢47-48
- 综述48-58
- 参考文献52-58
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