罗哌卡因对人肝癌Sk-hep-1细胞株增殖抑制作用和凋亡的机制研究

发布时间：2021-02-08 07:44

　　背景:近年来研究表明局麻药通过不同机制发挥抗肿瘤作用。罗哌卡因是一种新型长效的酰胺类局部麻醉药,一般用于局部浸润麻醉、椎管内麻醉、区域神经阻滞及术后镇痛。随着局麻药抗肿瘤作用的研究深入,罗哌卡因的抗肿瘤作用越来越引起学者的研究兴趣。目的:观察罗哌卡因对人肝癌Sk-hep-1细胞株增殖和凋亡的影响并探讨其抗肿瘤作用机制。方法:实验利用MTT法检测对照组,400μM,800μM,1200μM罗哌卡因处理人肝癌Sk-hep-1细胞株和人正常肝细胞L-02细胞株24h后,观察细胞毒性作用;选择400μM,800μM,1200μM罗哌卡因处理人肝癌Sk-hep-1细胞株24h,48h和72h后观察细胞存活率变化;不同浓度的罗哌卡因（400μM,800μM,1200μM）作用于人肝癌Sk-hep-1细胞24 h后,应用DAPI核染色法,观察人肝癌Sk-hep-1细胞发生凋亡时形态学变化;400μM,800μM,1200μM罗哌卡因处理人肝癌Sk-hep-1细胞24h后,蛋白免疫印迹法检测罗脈卡因对Cleaved caspase-3、Cleaved Caspase-9、Bcl-2、Bax、Cyt-c... 

【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２罗哌卡因处理不同时间对Ｓｋ－ｈｅｐ－ｌ细胞增殖的影响??＿

胞２４ｈ后，对照组细胞活力为９３．８１％，４００?ｎＭ组细胞活力为７９．６７％，８００?组细胞活??力为５９．２８％，１２００?ｐＭ组细胞活力５２．１３％，能够明显抑制细胞的增殖，随药物浓度升高??其抑制作用增强，且有显著性差异（户＜〇．〇５），见图１Ａ；而在正常肝细胞株Ｌ－０２中，罗??哌卡因则无明显抑制作用（Ｐ＞?０．０５），见图１Ｂ。，结果表示罗哌卡因通过非细胞毒性作??用抑制人肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞增殖。统计分析得出罗哌卡因在肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞株中的半??抑制浓度ＩＣ５０为１３０３ｐＭ。??Ａ??１５０－１??”?Ｓｋ－ｈｅｐ－１??｜?ｉｏｏ－?ｎｒ?＊??■Ｉ?ｔ?Ｔ?？??＝５〇．?Ｈ?瞧?ｄａ?ｔ??Ｒｏｐｉｖａｃａｉｎｅ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ｉｉｍｏｌ）??图１Ａ不同浓度罗哌卡因对Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞的影响??１５??

３．３罗哌卡因对Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞株凋亡的影响??用４００?ｐＭ、８００?＿［、１２００?的罗呢卡因预处理肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞２４ｈ，用ＤＡＰＩ进行??核染色，荧光显微镜下观察。如图３所示，罗呢卡因干预后，细胞核呈致密浓染且出现核浓缩、核??边集等典型的凋亡形态学变化，对照组细胞核完整，臟饱满。??■?獅關???????????８００?（ｉｌｌ?１２００１１１??．？?????????ＷＢ＾１ＷＢａａＩＰｉＨｉＰｉＨｉｉ??ＨｉＭｌＭ＾Ｍ??ｊＨＫＵｙＢＳＭＫＨＳ＾＾Ｂ§ＢＢ９９８８ＫＢＢ９Ｂ＠ｆｌＢ９Ｓ８§９ＨＨＫ８９ｌ??图３光学显微镜下观察ＤＡＰＩ染色的细胞形态??３．４罗哌卡因对ＳＫ－ｈｅｐ－１细胞凋亡相关蛋白水平的影响??３．４．１罗哌卡因对促凋亡蛋白Ｂａｘ表达的影响??４００?ｐＭ、８００?ｐＭ、１２００?ｆｉＭ罗哌卡因作用于肝癌Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞２４ｈ后，用免疫印迹法??检测分析促凋亡蛋白Ｂａｘ表达水平。免疫印迹法条带分析的结果显示，与对照组相比罗哌??卡因作用于Ｓｋ－ｈｅｐ－１细胞２４ｈ后，促凋亡蛋白Ｂａｘ表达水平显著升高（尸＜〇．〇５），见图４。??１７??


本文编号：3023594