不同年龄阶段大鼠连合下器Sox2阳性细胞的形态学观察

发布时间：2017-04-23 16:08

  本文关键词：不同年龄阶段大鼠连合下器Sox2阳性细胞的形态学观察，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察出生后不同年龄阶段大鼠连合下器Sox2阳性细胞的分布和形态结构的变化。探讨在连合下器中神经干细胞的增殖与分化,从而研究在连合下器中神经干细胞的功能和意义。方法：雄性健康SD大鼠,选取4周龄、8周龄、16周龄、24周龄各6只,共24只。麻醉后,经心脏灌注4%多聚甲醛磷酸缓冲液(0.1mol/ L, pH7.2).常规脱水、浸蜡、包埋,切片后,用免疫组化法检测连合下器处Sox2的表达。1标本制备：将不同年龄阶段组别SD大鼠以水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉,自升主动脉灌注4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液(0.1mol/L, pH7.2)行前固定,立即取脑,后固定,经脱水,透明,包埋,选取含连合下器部分,石蜡切片机冠状面切片,厚度约为5μm,制成石蜡切片。本次实验对实验动物的处置符合动物伦理学要求。2免疫组织化学染色：将上述标本取材中得到的石蜡切片经Sox2免疫组织化学染色,苏木精复染后,中性树胶封片,待干燥后使用Olympus BX-UCB光学显微镜观察并照相。3统计学处理：实验结果中所示阳性细胞采用专业图像分析软件Image-Pro Plus 6.0测定阳性细胞数,计算阳性率。经SPSS16.0统计学分析,以P0.05为具有显著性差异。结果：Sox2免疫组织化学染色后,切片在光学显微镜下观察可以看到Sox2阳性细胞为胞核着色,连合下器与周围边界清晰,腹侧为室管膜面,室管膜面上可见清晰的界线。室管膜面清晰界线的背侧为无结构均质状结构,无阳性表达,均质状结构的背侧可以看到细胞层,细胞呈圆形或椭圆形,不同年龄阶段连合下器区域阳性细胞形态、分布各异,排列致密。在连合下器背侧边缘处可见丰富血管分布,两侧部多于中央部,血管内皮细胞清晰明显。在显微镜下通过测量得到：室管膜细胞大小约为3.5～6.5μm×7.5～10.5μm。将显微镜下观察得到的图像保存,选取相同位置的横断面,同一倍数,相同面积,采用专业图像分析软件Image-Pro Plus 6.0测定阳性细胞数,计算阳性率。4组大鼠阳性率%(x±S, n=6)分别为12.17±2.93,54.17±4.49,76.33±4.23,96.33±1.86。经SPSS16.0分析显示4组组间P0.05,均有显著性差异。结论：1观察发现随年龄的增加,连合下器的细胞层数逐渐减少,均质层逐渐增厚。2观察发现随年龄的增加,Sox2阳性细胞依次增多,低周龄阳性细胞分布以中央部为主,高周龄逐渐向两侧扩大。
【关键词】：连合下器 SD大鼠 神经干细胞 Sox2
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R338
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文缩写9-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-16
• 结果16-19
• 附图19-29
• 附表29-30
• 讨论30-31
• 结论31
• 参考文献31-33
• 综述 室周器官神经干细胞分布与功能的研究进展33-40
• 参考文献36-40
• 致谢40-41
• 个人简历41

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1 郭宇;不同年龄阶段大鼠连合下器Sox2阳性细胞的形态学观察[D];河北医科大学;2015年

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本文编号：322659