健脾疏肝降脂方对非酒精性脂肪肝小鼠血脂及肝组织病理学的影响

发布时间：2017-05-13 13:05

  本文关键词：健脾疏肝降脂方对非酒精性脂肪肝小鼠血脂及肝组织病理学的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察健脾疏肝降脂方对高脂肪饮食和药物引起的非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型小鼠的影响,并探讨该方的作用机制,为临床应用推广提供有力的证据。方法:72只SPF级昆明种小鼠,给予全价营养饲料喂养1周后,随机分为6组,即正常组,模型对照组,壳脂胶囊组,健脾疏肝降脂方高、中、低剂量组,每组12只,雌雄各半。正常组给予普通饲料,其它各组采用喂高脂饲料和药物诱导建立NAFLD小鼠模型。同时,除正常组和模型对照组外,各治疗组给予健脾疏肝降脂方水煎液或壳脂胶囊水溶液灌服,正常组和模型组给予等体积的超净水灌服,各组小鼠(除正常组外)在下腹部给予皮下注射10%的CCl4食用油溶液,剂量为0.1m L/10g,每周2次,共持续6周。最后一次治疗后禁食12h,给予10%水合氯醛溶液4m L/kg腹腔内注射麻醉,麻醉成功后,给予腹主动脉穿刺取血,将血样低温下离心分离,检测血清甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平或反应性变化及肝组织游离脂肪酸(FFA)的含量。处死小鼠后,快速剖取肝脏称其湿重,计算肝指数,用0.9%氯化钠溶液冲洗,在肝脏左叶同位置处剪一小块大小适宜的肝组织置于4%多聚甲醛液中固定,给予肝组织石蜡包埋,切片,HE染色,观察组织病理学变化。结果:①模型组与正常组比较,其小鼠肝指数、肝湿重及血清TG、TC、ALT、AST、LDL及FFA均明显升高,有显著统计学意义(P0.01);②与正常组相比,健脾疏肝降脂方高、中剂量组肝指数、肝湿重、TG、TC、ALT、AST、LDL及FFA均无统计学意义(P0.05);③与模型组对比,健脾疏肝降脂方高、中、低剂量组和壳脂胶囊组各项指标均明显降低或者减轻,有统计学意义(P0.05);④在改善各项指标方面,健脾疏肝降脂方高、中剂量组明显优于壳脂胶囊组及低剂量组,无统计学意义(P0.05);⑤光镜下可见:肝小叶结构清晰,中央静脉周围肝细胞呈辐射形式排列,形态一致,大小均匀,未见脂肪变性及坏死、炎性细胞侵润;显微镜下见,模型对照组小鼠肝小叶构造不清楚,肝小叶出现明显损害,肝细胞体积肿胀明显,肝细胞水肿明显,可见肝组织呈弥漫性脂肪变,核增大,细胞索无规律排列,可见由两个及两个以上破裂的肝细胞相互融合,其中又以小叶中央病变严重,大量炎性细胞入侵,有时可见凋亡小体;各治疗组及壳脂胶囊组小鼠肝细胞脂肪变均有不同程度的改善趋势,治疗高、中剂量组和壳脂胶囊组效果好于低剂量组;⑥电镜下可见:正常组肝组织中的超微结构肝细胞内有着丰富的线粒体,线粒体嵴较为丰富,但也可见有少数的脂滴存在,模型组小鼠肝组织中的超微结构肝细胞内有着丰富的线粒体,线粒体嵴几乎消失,但也可见有大量的脂滴存在,和大量的胶原纤维存在,各治疗组及壳脂胶囊组小鼠肝细胞脂肪变均有不同程度的改善趋势,治疗高、中剂量组和壳脂胶囊组效果好于低剂量组。结论:健脾疏肝降脂方对NAFLD小鼠的肝功能、血脂TG、TC、HDL、LDL及肝组织FFA有良好的调节作用,本方能通过促进NAFLD小鼠病变肝脏细胞的恢复来降低血清转氨酶的活性,减低血脂的含量及FFA的活性,缩小NAFLD小鼠的肝脏外形及减轻重量,从而改善NAFLD小鼠肝脏的脂肪变性程度;恢复肝细胞中的线粒体,增强肝细胞的线粒体和增加线粒体嵴的作用,使得肝细胞内产生大量ATP增强其能量代谢,从而使脂肪酸代谢增强,减少脂滴的形成。高、中、低三个剂量组由于计量的关系而疗效差异明显,随着剂量的增加而疗效增加,成正效的比例关系。
【关键词】：健脾疏肝降脂方 非酒精性脂肪肝 小鼠模型 血脂 肝脏病理
【学位授予单位】：河南中医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料与方法11-16
• 1 实验材料11-12
• 2 实验方法12-16
• 结果16-20
• 1 一般情况观察及动物死亡情况16
• 2 各组小鼠肝湿重及肝指数的变化16
• 3 各组小鼠肝组织FFA的变化16-17
• 4 小鼠血脂含量的变化17
• 5 各组小鼠血清ALT、AST活性的变化17-18
• 6 各组小鼠肝组织光镜及电镜的变化18-20
• 理论探讨20-27
• 1 中医学对非酒精性脂肪肝的认识20-22
• 2 导师对非酒精性脂肪肝的认识22
• 3 健脾疏肝降脂方组成及方义分析22-25
• 4 NAFLD的动物模型选择依据25
• 5 健脾疏肝降脂方治疗非酒精性脂肪肝的可能机理25-27
• 结论27-28
• 致谢28-29
• 参考文献29-31
• 附录31-44
• 附录1 文献综述31-41
• 参考文献36-41
• 附录2 光镜下肝组织病理照片41-42
• 附录3 电镜下肝细胞内线粒体及脂肪滴病理照片42-43
• 附录4 英文缩略词表43-44
• 附录5 在校期间论文论著和科研情况44

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